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目的神经退行性疾病是一类复杂的疾病类型,而神经细胞受损是导致该类疾病的一个主要诱因。近年来,红景天苷因其广泛的药理活性而倍受关注,而它在神经细胞保护方面的作用也日益引起人们的重视。红景天苷的药理作用纵然广泛,然而它的药效却始终存在不尽如人意之处,其亲水性太强,不容易透过细胞质膜和血脑屏障,从而影响其发挥作用。现阶段对红景天苷类似物发挥神经细胞保护的报道较少,在前期研究中本实验室合成了一系列红景天苷类似物,本研究通过建立神经细胞损伤模型,模拟体内神经细胞损伤状态并将红景天苷类似物运用至其中,以探明它们在神经细胞保护方面发挥的作用。结果表明,与红景天苷相比较,MADP和化合物6的亲酯性有了很大提高,其细胞保护作用比红景天苷更强,该研究结果为今后进一步开发防治神经系统退行性疾病的新药提供参考依据。方法本研究采用两种细胞损伤模型,在第一种模型中,预先给予海马神经元以MADP(120,240μM)和Sal(120,240μM)预保护24 h,再以125μM谷氨酸作用海马神经元15 min,细胞继续培养24 h后,光镜下观察海马神经元形态变化,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)及乳酸脱氢酶(LDH)释放量评估细胞活力,同时采用Hoechst 33342、TUNEL、Annexin V-FITC/PI染色检测神经元凋亡情况,通过Fluo-4/AM检测[Ca2+]i动态变化,最后通过QPCR和Western blot实验分别检测与凋亡相关的基因和蛋白的表达情况。在第二种模型中,预先给予PC12细胞以化合物6,7,11,12(75,150,300μg/mL)和Sal(300μg/mL)预保护24 h,再以低糖低血清损伤细胞24 h,通过MTT实验检测细胞活力,光镜观察细胞形态变化,采用Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率,最后通过Western blot和Caspase-3活性检测试剂盒分别检测Bcl-2/Bax蛋白的表达和Caspase-3的活性。结果谷氨酸损伤模型中的MTT和LDH释放测定实验结果表明,相同条件下MADP组中细胞活力高于Sal组;Hoechst 33342、TUNEL、Annexin V-FITC/PI染色揭示了MADP组中细胞凋亡率低于Sal组;Fluo-4/AM荧光染色结果显示Sal组中[Ca2+]i荧光强度强于MADP组;Sal组的Caspase-3 mRNA表达量低于MADP组;Western blot结果显示两个类别组中Bcl-2/Bax以及p-ERK蛋白表达量均未发生变化,而MADP组中p-Akt和p-JNK的表达量高于Sal组。在低糖低血清损伤模型中,MTT实验的结果表明大多数受试化合物都发挥了对PC12细胞的保护作用,尤以化合物6的保护作用最强;化合物6的预保护能改善受损的PC12细胞形态;Hoechst 33342染色、Caspase-3活性测定以及Western blot实验结果均揭示了化合物6可剂量依赖性的抑制低糖低血清损伤诱导的PC12细胞凋亡,化合物6在300μg/mL时发挥的保护作用最佳。结论红景天苷类似物MADP和化合物6较红景天苷能更好的发挥对海马神经元和PC12细胞的保护作用。