目的：实验研究外切糖苷酶清除人的红细胞及肝脏血型抗原,探讨人体器官血型转换的可行性；方法：一、绿色咖啡豆来源α-半乳糖苷酶清除人的细胞表面的B型抗原；由于α-半乳糖苷酶的最适反应温度是25℃,最适宜的ph为6.5,反应的最佳溶液为磷酸钾盐缓冲液。实验不同稀释度的α-半乳糖苷酶清除红细胞表面的血型抗原,筛选对酶清除血型抗原的最适反应酶浓度,10倍稀释的α-半乳糖苷酶处理磷酸钾盐溶液稀释的悬浮红细胞60min,流式细胞仪分析α-半乳糖苷酶对红细胞B抗原清除效果；在不同温度条件下(4℃、25℃),对比观察酶的活性变化；采用肝移植手术中病肝为实验对象,建立肝脏的灌注模型。用UW液+/-α-半乳糖苷酶灌注离体肝脏标本,灌注液保存4h,免疫荧光技术分析肝组织血型抗原的变化,从器官水平探讨α-半乳糖苷酶体对肝脏B血型抗原的清除效果.实验组和对照组,组内不同时间段的血型抗原的水平进行单因素方差分析,对比组内血型抗原水平差异是否有统计学意义；组间相同时间段血型抗原水平进行独立样本资料的t检验,对比组间同一时间点血型抗原水平差异是否有统计学意义。二、基因重组的α-N-乙酰半乳糖苷酶清除人的红细胞表面的A型抗原；制备5%的A型红细胞悬液,经不同稀释度的α-N-乙酰半乳糖胺酶处理60min,流式细胞仪分析,绘制不同稀释度的酶对血型抗原清除率的曲线,筛选对酶清除血型抗原的最适反应酶浓度；在不同温度条件下(4℃、37℃),对比观察酶的活性变化；采用肝移植手术中病肝为实验对象,用UW液+/-α-N-乙酰半乳糖苷酶灌注离体A型肝脏标本,灌注液保存4h,免疫荧光技术分析肝组织血型抗原的变化,从器官水平探讨α-N-乙酰半乳糖苷酶对肝脏A血型抗原的清除效果。实验组和对照组,组内不同时间段的血型抗原的水平进行单因素的方法分析,对比组内血型抗原水平差异是否有统计学意义；组间相同段血型抗原水平进行独立样本资料的t检验,对比组间同一时间点血型抗原水平差异是否有统计学意义。结果：(1)不同稀释度的α-半乳糖苷酶对红细胞表面B抗原的清除效率不同,10倍稀释度的α-半乳糖苷酶清除B抗原效率最高；低温降低了α-半乳糖苷酶清除血型抗原的效率。用UW液+α-Gal灌注离体的B血型肝脏标本,低温保存4h,肝脏B抗原的含量明显减少。实验组内不同时间血型抗原水平经过ANOVA分析,P值<0.01,差异有统计学意义。实验组肝组织B抗原平均水平1h减少至58%,2h为10%,4h为4%,而对照组血型抗原水平未见明显的变化；(2)不同稀释度的α-NAGA对红细胞A型抗原的清除效率不同,100倍稀释的α-NAGA可以较好的清除红细胞的A抗原；对比4℃与37℃条件下,酶对血型抗原的清除效果,低温可降低酶活性,在4℃条件下,α-NAGA仍具有清除红细胞表面29%血型抗原能力；用UW液+α-NAGA灌注离体的A血型肝脏标本,灌注结束低温保存4h,与灌注前相比,灌注后的肝脏A血型抗原的含量明显降低。实验组内不同时间血型抗原水平经过ANOVA分析,P值<0.01,差异有统计学意义。实验组肝组织A抗原平均水平,1h减少为46%、2h为15%、4h为3%；结论：(1)α-半乳糖苷酶可有效清除红细胞表面B血型抗原,实现B→0的血型转换；用UW液+α-半乳糖苷酶体外灌注离体B型肝脏标本,肝组织内血型抗原的含量明显降低,肝组织血型抗原清除后,但并未达到不可检测的水平；(2)α-N-7,酰半乳糖苷酶可有效清除红细胞表面A血型抗原,实现A→0的血型转换；用UW液+α-N-乙酰半乳糖苷酶灌注离体A型肝脏标本,器官在4℃保存4小时,肝组织A抗原的含量明显降低。