TLR9/MyD88对溃疡性结肠炎患者外周血TNF-α、IL-6及信号转导通路的影响

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目的通过检测不同程度溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)及正常人外周血内TLR9、MyD88、IL-6和TNF-α表达水平的差异,以探讨TLR9对MyD88介导的信号转导通路及IL-6、TNF-α的影响,及上述各因子与UC病情活动度的关系。方法采用RT-PCR方法检测不同程度UC患者及正常对照组外周血TLR9和MyD88mRNA的表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IL-6和TNF-α蛋白表达水平。分别比较活动期UC患者与缓解期、正常对照组TLR9、MyD88、IL-6和TNF-α表达水平的差异;比较缓解期患者与正常对照组的差异;比较重度UC患者与轻、中度患者外周血中TLR9、MyD88、IL-6和TNF-α水平的差异。实验数据用SPSS13.0统计软件包进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,数据采用单因素方差分析中的SNK-q检验,卡方检验处理,两组间两两比较采用t检验。各因子之间的相关性采用Pearson相关分析,与病情活动度的相关性采用Spearman等级相关分析;结果以p<0.05作为有统计学意义的判断标准。结果:1、 RT-PCR结果:活动期UC患者外周血淋巴细胞中TLR9mRNA和MyD88mRNA表达水平高于缓解期和正常对照组,差异有统计学意义(p<0.05);缓解期患者与正常对照组相比差异无统计学意义(p>0.05);重度UC患者外周血中TLR9mRNA和MyD88mRNA表达水平高于轻、中度组,差异有统计学意义(p<0.05)。TLR9mRNA和MyD88mRNA表达水平之间关系采用Pearson相关分析各因子之间的相关性得出:TLR9、MyD88的mRNA表达水平呈正相关r=0.806,p<0.01;采用Spearman分析TLR9和MyD88的mRNA分别与UC的活动程度成正相关:TLR9rs=0.810p<0.01,MyD88rs=0.799p<0.01。2、ELISA结果:活动期UC患者血清中TNF-α和IL-6的蛋白表达水平分别与缓解期、正常对照组相比,差异有统计学意义(p<0.05),缓解期与对照组相比,差异无统计学意义(p>0.05);重度UC患者血清中TNF-α和IL-6表达水平高于轻、中度组,差异有统计学意义(p<0.05)。采用Pearson相关分析,分析TNF-α和IL-6蛋白表达水平之间的相关性得出rs=0.834p<0.01;采用Spearman分析TNF-α和IL-6与UC的活动程度正相关:TNF-α:rs=0.820p<0.01,IL-6:rs=0.879p<0.01。结论1. TLR9、Myd88、IL-6和TNF-α四者之间在UC外周血中的表达呈显著正相关,TLR9可能通过介导Myd88引发信号通路下游的基因表达,从而导致炎症因子的释放。2. UC患者外周血中TLR9、MyD88、IL-6和TNF-α表达较缓解期及正常对照组明显升高,且与UC的严重程度呈正相关,提示其与UC患者病情的活动度有关。
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