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对精液保存后进行人工授精是目前加速优良种畜繁育的有效手段之一,精液的有效保存在畜牧业生产中占有重要地位。精液体外保存主要有冷冻保存和液态保存两种方法。精液冷冻保存是精液长期保存的有效方法,但是对山羊精液进行冷冻保存后进行人工授精或者体外授精的所获得的受胎率并不理想,从而限制了冷冻保存在山羊精液保存上的应用。而山羊精液液态保存与冷冻保存相比具有设备简单,操作简便等优点,并能达到较长保存时间。如何提高精液保存质量甚至进一步延长山羊精液液态保存时间成为推广山羊人工授精的关键。 本实验以5只健康的鲁北白山羊为实验动物,采用假阴道法采精。在保存的不同时间分别检测了精子质膜完整性、顶体完整性、线粒体功能完整性和DNA完整性等几个方面来对精液保存的质量进行鉴定。同时分别用保存了12天和16天的精液进行人工授精,并对受胎率进行记录。 结果表明: 1.在体外保存过程中,精子活力和存活率都会随着时间延长逐渐下降,活力在第6天时为73.9%,与鲜精相比已经出现显著差异,在第15天时,活力为45.3%。存活率在第15天出现显著差异,在第15天时,存活率为98.1%。 2.精子质膜完整性随着保存时间延长逐渐降低,在第12天时质膜完整率为71.8%,显著低于新鲜精液,在第15天时质膜完整率降低至65%。 3.在体外保存过程中,精子顶体完整性在保存的第6天时为90.1%,显著低于新鲜精液。随着保存时间延长,顶体完整率逐渐下降。第15天时顶体完整率为83.6%。 4.精子线粒体功能完整性与新鲜精液相比,在第12天时为84.3%,显著低于新鲜精液,并呈逐渐降低的趋势。在保存的第15天时,有线粒体功能完整性的精子比例为81%。 5.精子DNA完整率在第9天时为85.3%,与鲜精相比出现显著差异。而且随保存时间延长,DNA完整率持续降低。在保存的第15天时,精子DNA完整率为42.7%。 6.用保存12天的精液进行输精,冬季输精获得了30%的受胎率,同期对照受胎率为33.3%。春季输精获得了78.6%的受胎率,同期对照受胎率为83.3%。 7.用保存16天的精液进行输精,获得了20%的受胎率,同期对照受胎率为71.4%。 以上实验结果说明,在山羊精液的体外液态保存过程中,精子的各项生理指标随着保存时间的延长都在逐渐下降。精子活力和DNA完整性在保存15天之后下降的比例比较大。保存到12天时,精子顶体完整性、质膜完整率、线粒体功能完整性和DNA完整性虽然在保存后与鲜精相比差异显著,但是用保存了12天的精液进行人工授精实验,在春季输精获得了78.6%的受胎率,效果较好。用保存了16天的精液进行人工授精实验,受胎率为20%,受胎率较低。