DNA分子的完整性对细胞正常的生命活动至关重要,但是外界环境和生物体内部的因素经常会导致DNA分子的损伤或遗传信息的改变,这些损伤或改变对细胞的功能或者生物体的生存都会产生影响,因此,生物进化过程中细胞拥有了一套复杂的修复DNA损伤的机制,使细胞能够维持DNA的稳定性和完整性。p53是DNA损伤应答网络中的重要组成部分,在DNA损伤修复中发挥着至关重要的作用。p53作为一个肿瘤抑制基因,在抑制肿瘤的发生和发展中有重要的作用。大量统计数据表明,p53基因在半数以上的人类肿瘤中突变或者功能失常。DNA受到损伤后,p53基因被激活,阻滞细胞周期,使DNA复制过程受阻,并快速启动修复机制,使损伤的DNA得以修复。当DNA损伤过度不能被修复时,p53会诱导损伤的细胞凋亡,从而降低DNA损伤所造成的肿瘤发生的几率。正常状态下,细胞内p53的mRNA水平很高,并且有大量蛋白质的合成,但是此时的p53蛋白极易降解,使细胞中的p53蛋白维持在较低水平,该过程主要是通过泛素化介导的蛋白酶体降解途径实现的。在泛素化修饰中,MDM2作为p53的泛素连接酶,可以直接和p53结合,促进p53蛋白的降解。当细胞中的DNA受到损伤时,细胞中的p53蛋白水平迅速升高,参与调控细胞周期进程和细胞凋亡。但是DNA损伤后,p53蛋白是如何被激活的,这个问题还没有研究清楚。我们在研究NLK蛋白在DNA损伤中的作用时发现,DNA损伤后,NLK蛋白的变化水平与DNA损伤后p53蛋白的变化水平有相同的趋势。并且,在NLK敲除的细胞中,Etopside诱导DNA损伤后p53蛋白水平有明显的下降；相反的,过量表达NLK可以稳定p53的蛋白水平,并且能够提高p53的活性,这种稳定作用会随着NLK剂量的增加而增加,但该作用与NLK的激酶活性无关,因为NLK的激酶突变体同样能够稳定p53的蛋白水平,提高p53的活性。泛素化实验结果表明,NLK通过抑制MDM2介导的p53的泛素化降解来稳定p53蛋白。免疫共沉淀实验结果显示,NLK能够和p53相互结合,并且这种作用会因为DNA损伤诱导剂的加入而变强。同时我们通过截短体的免疫共沉淀实验发现,NLK和p53结构的完整性对于两者之间的相互作用十分重要。我们检测到过表达NLK能够使p53和MDM2之间的相互作用变弱,相反的在NLK敲除的细胞中,两者之间的相互作用增强。综上,我们的研究表明,NLK通过抑制MDM2介导的p53的泛素化降解途径调控p53蛋白的稳定性和活性。我们的研究证明了NLK作为一个重要的调节因子在DNA损伤后诱导p53的表达过程中发挥重要的作用。这一结果表明,NLK在肿瘤的发生过程中可能发挥了重要的作用。由于NLK同时也参与了B-catenin信号通路,并且调节包括Myb在内的多个转录因子,因此NLK在肿瘤发生中可能有更广泛的作用。我们的研究只证明了NLK在DNA损伤中调节p53的稳定性的作用,对其功能的全面认识还需要有更进一步的研究。