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目的:研究金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对T细胞TCR信号通路中BCL11B、NF-κB分子转录与蛋白表达的影响;探讨细菌外毒素超抗原和T细胞介导的炎症、T细胞白血病发生之间的可能关系,为阐述淋巴细胞白血病发病机制提供实验数据。方法:1.实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测BCL11B以及NF-κB基因表达。2.免疫印迹(Western blotting)检测BCL11B以及NF-κB蛋白表达。3.BCL11B-si RNA转染技术沉默BCL11B,结合q RT-PCR与Western blotting技术。结果:1.在1μg/m LSEA作用下,Jurkat细胞中的BCL11B以及NF-κB基因m RNA的表达量随着刺激时间(0、15、45、180、360 min)的增加明显上调,且BCL11B基因m RNA的表达量明显大于NF-κBm RNA表达量(P<0.05)。2.在20ng/m L浓度乙酸肉豆蔻佛波醇(PMA)联合1μM离子霉素(IO)作用下,Jurkat细胞中的BCL11B以及NF-κB基因m RNA的表达量随着刺激时间(0、15、45、180、360 min)的增加明显增加(P<0.05),两者变化类似SEA刺激结果。3.在20ng/m L TNF-α作用下,Jurkat细胞中的NF-κB基因m RNA的表达量随着时间(0、15、45、180、360 min)的增加明显上调(P<0.05);但是Jurkat细胞中的BCL11B基因m RNA的表达量没有明显变化。4.在1μg/m L SEA作用下,BCL11B、NF-ΚB分子的蛋白表达量随刺激时间(0、15、45、180、360 min)而明显增加(P<0.05),与m RNA水平类似。5.在20ng/m L PMA联合1μM IO作用下,BCL11B、NF-ΚB分子的蛋白表达量和刺激时间有关系(P<0.05),随时间(0、15、45、180、360 min)的增加逐步增加,与m RNA水平类似。6.在20ng/m L TNF-α作用下,BCL11B基因蛋白表达量无明显变化;NF-ΚB基因蛋白的表达量随刺激时间(0、15、45、180、360 min)的增加明显增加(P<0.05),与m RNA水平类似。7.BCL11B-si RNA转染Jurkat细胞48小时后,以1μg/m L的SEA刺激Jurkat细胞(0、15、45、180、360 min)后,NF-κB基因蛋白表达无明显改变(P>0.05)。8.BCL11B-si RNA转染Jurkat细胞48小时后,以20ng/m L的PMA和1u M的IO刺激Jurkat细胞0、15、45、180、360 min后,NF-κB基因蛋白表达量无明显改变(P>0.05)。结论:1.细菌外毒素SEA可以刺激T细胞上调BCL11B基因、蛋白水平的表达,以及NF-κB基因、蛋白水平的表达。2.SEA以超抗原的方式,通过TCR途径刺激BCL11B基因、蛋白水平的表达、以及NF-κB基因、蛋白水平的表达。3.超抗原SEA可以通过TCR途径诱导BCL11B基因的表达而影响NF-κB的表达水平。