本研究以春剑(Cymbidum longibracteatum)花器官(花蕾、花梗、花小梗、合蕊柱、萼片)为外植体进行离体培养研究。重点研究了不同切割方式、基本培养基及激素配比对不同花器官培养时褐化、生长和愈伤组织发生的影响；同时详细研究了不同防褐处理对花梗切段培养褐化的影响。通过完全设计、正交设计、结合方差分析、新复极差分析、多重比较等统计方法,确定各个花器官离体培养可能的途径以及适宜的培养条件。结果表明：1、切割方式研究中表明,花蕾、花梗和花小梗的切割方式以纵切最佳,萼片以横向刻伤方式最佳,合蕊柱以不切培养效果最好。2、花梗切段愈伤组织诱导的最佳配方为：B5+2,4-D2.Omg/L+TDZO.6mg/L +GA30.5mg/L,诱导率为7.32%。2,4-D对花梗切段愈伤组织诱导有显著影响,最适浓度为2.0mg/L；花蕾、合蕊柱、萼片、花小梗均未诱导出愈伤组织,但生长变化显著,合蕊柱、花小梗培养后有突点出现,表面凹凸不平,有发生愈伤组织的趋势。3、当花芽长度为2cm时,切割培养的花梗褐化较低；花梗的切割厚度为8mm时,外植体褐化率较低；PVP、VC、柠檬酸、8-HQS对花梗切段褐化都有显著的抑制作用,其中以8-HQS效果最好,褐化率比对照组低33.82%；冷预处理对花梗切段褐化有显著抑制作用,以2℃冷处理24h效果最佳,比对照组低35.99%；处理中以植株在45℃热激处理00min后,切割的花梗褐化率最低,比对照低39.11%。花芽在50℃下热激处理120S后接种培养,褐化率高于对照组5.40%；转瓶越频繁,花梗褐化率越低,每天转一次瓶对减轻花梗褐化的效果最好,比对照组低44.52%；培养温度中以15℃培养时褐化率最低,褐化率比对照组低30.42%。