肝癌细胞膜单克隆抗体Hepama-1的质量控制及其放射性标记物的临床前毒理学研究

来源 :中国科学院研究生院(上海生命科学研究院) | 被引量 : 0次 | 上传用户:wskiqpk
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本文对正在申报的一类新药131碘肝癌细胞膜单克隆抗体Hepama-1(DGDK-1)的质量控制及临床前动物安全性评价进行了初步探索,鉴于国内还没有以单克隆抗体为载体的任何抗癌药物获得过新药证书,国际上也还没有过以131碘化钠为效应物的单克隆抗体药物,因此,此项探索无疑有其相当的示范意义。此外,在单克隆抗体生物学特性的分析过程中,我们还发现淋巴结是一个EABA器官,长期以来一直困惑学界的所谓肿瘤单克隆抗体对淋巴结的“阳性”交叉反应问题得到了澄清。本文进行了单抗Hepama-1的质量控制试验,结果表明Hepama-1 是一种对人体肝癌细胞有高度选择性的单克隆抗体, 经Bradford 法测定, 其浓度大于 2.5 mg / ml; 经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及电泳胶扫描积分计算, 其杂蛋白及多聚体的面积小于蛋白分离峰总面积的 5 %; 经间接免疫荧光法测定, Hepama-1对人肝癌 SMMC-7721 细胞的有效免疫活性为 1 微克 / 毫升; 不含支原体; 残存鼠源 DNA 含量小于 100 pg / 剂;每毫升含细菌内毒素小于 5 Eu;放置于4℃的制成产品后的单克隆抗体Hepama-1至少能稳定保存1年。本文就一直困扰学界的所谓单克隆抗体对淋巴结“阳性”反应问题,以DAKO LSAB 法、DAKO EnVision法、实时生物分子相互作用分析技术及椭偏成像生物显微技术等进行了系统的研究,证明人淋巴结为EABA(内源性抗生物素结合活性)的器官,以前所看到的“阳性”反应完全是一种EABA所引起的假“阳性”反应。本文研究了DGDK-1注射小鼠后的急性毒性试验,一次尾静脉注入DGDK-1 74MBq/每鼠(相当于临床人用剂量的200倍),观察小鼠的急性毒性反应,结果表明DGDK-1在指定的给药条件下,在小鼠体内没有引起明显的急性毒副反应。 <WP=3>本文还研究了DGDK-1对大鼠重复给药的毒性试验,每天尾静脉注射 1 次,连续给药 10 天, 放射总活度为 300 MBq(相当于临床人用剂量的162-202倍),观察 3 个月,结果表明在指定的剂量及给药条件下,重复给药不会引发大鼠体内明显的毒副反应。
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