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目的:探究:1.相对简洁有效的背根神经节神经元细胞纯化方式;2.神经元培养体系内相关因素对β3-tubulin阳性神经轴突生长状态的影响。方法:1.⑴显微操作取新生SD大鼠背根神经节,经消化,离心后制成细胞悬液;⑵在30分钟、60分钟及100分钟,分组观察PDL、PDL-LN及I型胶原蛋白三种底物组背根神经元与非神经元细胞的贴壁数量。2.⑴显微操作下取新生SD大鼠背根神经节,制成培养用组织块;⑵通过完全随机设计分组观察培养72小时后,底物、血清、有丝分裂抑制剂对背根神经节整节培养中β3-tubulin阳性轴突生长长度和分枝情况的影响。结果:1.⑴30分钟时平均每视野神经元细胞贴壁数量:PDL组为18个,PDL-LN组为25个,I型胶原蛋白组为5个;平均每视野非神经元细胞贴壁数量:PDL组为34个,PDL-LN组为31个,I型胶原蛋白组为11个,其中PDL组30分钟时相,神经元和非神经元细胞贴壁数量差异最大,差异有统计学意义(P<0.05);⑵60分钟时平均每视野神经元细胞贴壁数量:PDL组为58个,PDL-LN组为89个,I型胶原蛋白组为55个;平均每视野非神经元细胞贴壁数量:PDL组为40个,PDL-LN组为37个,I型胶原蛋白组为40个,其中PDL-LN组两类细胞贴壁数量差异有统计学意义(P<0.05),但贴壁神经元细胞数大于非神经元细胞数;⑶100分钟时平均每视野神经元细胞贴壁数量:PDL组为236个,PDL-LN组为360个,I型胶原蛋白组为136个;平均每视野非神经元细胞贴壁数量:PDL组为107个,PDL-LN组为60个,I型胶原蛋白组为77个,三组差异均有统计学意义(P<0.05),但神经元细胞贴壁数大于非神经元细胞贴壁数。2. DRG整节培养72小时后:⑴底物水平为PDL-LN时轴突生长分化情况最好,单位末梢数量均值为0.243个/微米,轴突长度均值为1626.40微米,与PDL水平和I型胶原蛋白水平相比差异有统计学意义;⑵血清浓度为5%时单位末梢数量最大,为0.250个/微米,但轴突长度在0%、5%和10%三个浓度水平上没有统计学差异(P>0.05);⑶5-FU在0浓度水平时所得阳性轴突末梢数最多,为0.253个/微米,轴突长度在0浓度时为1612.02±603.21微米,比20μmol/L和40μmol/L浓度水平均长,差异有统计学意义(P<0.05);④Ara-C在0浓度和10μmol/L浓度水平所得阳性轴突末梢数相当,均为0.192个/微米,高于20μmol/L水平组的0.127个/微米,而轴突长度在10μmol/L水平时最长,为1610.90±812.05微米,与0浓度和20μmol/L浓度相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.将离散背根神经节细胞悬液在PDL包被的玻片上差速贴壁30分钟,再将悬液吸出进行接种培养,可以在一定程度上起到分离纯化神经元细胞的作用。2.在进行DRG整节培养时,选择神经元专用培养基+PDL-LN细胞培养底物+10μmol/L Ara-C的培养因素组合,可获得最理想的β3-tubulin阳性轴突生长分化效果。