论文部分内容阅读
目的:本课题选用中医扶正固表的代表方玉屏风散,做干预支气管哮喘小鼠实验,通过观察玉屏风散对哮喘小鼠BALF(肺泡灌洗液)Th17相关细胞因子(如:IL-17、TGF-β1和IL-6)表达的影响,探讨玉屏风散防治支气管哮喘的可能作用机制,为玉屏风散的临床应用提供新的思路。方法:1.建立哮喘小鼠模型:48只SPF级雌性BALB/C小鼠,按随机原则分为正常对照组、哮喘模型组、玉屏风散高、中、低剂量组、地塞米松组:除正常对照组用生理盐水代替致敏和激发外,其余各组于实验第1d、8d、15d分别腹腔注射0.2mL致敏液,第22-28d雾化吸入2%OVA生理盐水;玉屏风散治疗组和地塞米松组在雾化激发前30min分别灌胃和腹腔注射给药。2.采用BALF进行炎性细胞分类计数;用双抗体夹心ELISA法检测BALF中IL-17、TGF-β1和IL-6含量;肺组织病理切片HE染色观察肺组织大体形态和炎性细胞浸润情况。结果:1.哮喘组小鼠BALF中白细胞总数及嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞计数明显高于正常对照组(P<0.05);地塞米松组、玉屏风散中剂量中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数明显减少,与哮喘组相比较差异有显著性意义(P<0.05)。2.肺组织病理观察:哮喘组小鼠肺内细支气管及血管周围有大量炎性细胞浸润,肺间质及肺泡腔内可见炎性细胞浸润,气道结构紊乱,气道上皮增生、肥大,支气管黏膜皱襞减少,管腔狭窄,管腔内黏液渗出物明显增多,肺泡腔间隔扩大、增厚,周围组织水肿及炎性细胞浸润;正常组小鼠肺组织支气管及肺泡结构清晰,气道黏膜上皮完整,有少量炎性细胞浸润。3.玉屏风散对哮喘小鼠BALF中细胞因子IL-17、IL-6、TGF-β表达的影响:哮喘组小鼠肺泡灌洗液中IL-17、IL-6含量明显升高,与正常组比较差异有显著性意义(P<0.05);地塞米松组、中剂量玉屏风散组小鼠BALF中IL-17含量明显下降,与哮喘组比较差异有显著性意义(P<0.05),提示玉屏风散、地塞米松对哮喘小鼠BALF中IL-17有抑制作用;地塞米松组小鼠BALF中IL-6含量与哮喘组比较差异无显著性意义(P>0.05);玉屏风散高、中、低剂量组小鼠BALF中IL-6含量与哮喘组比较仍较高,但差异无统计学意义(P>0.05),提示玉屏风散对哮喘小鼠BALF中IL-6无明显调节作用。结论:1. IL-17、IL-6均参与了支气管哮喘的发病过程。2.玉屏风散能减轻哮喘小鼠肺组织细支气管及血管周围炎性细胞浸润,改善气道炎症状态,减少气道上皮黏液分泌。3.玉屏风散对哮喘小鼠急性期IL-17有抑制作用,即玉屏风散对Th17细胞参与哮喘发病的过程有抑制作用,这种抑制作用可能通过上调Th1细胞的表达和促进IFN-γ的分泌,从而抑制IL-17的产生。