新型生物防腐剂纳他霉素生产方法的研究

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本文研究了一种新型生物防腐剂纳他霉素生产菌的选育,发酵工艺的确定及发酵条件的优化,纳他霉素的提取工艺以及纳他霉素对部分真菌的抑菌谱.以褐黄孢链霉菌(Streptomyces gilvosporeus)S-71为出发菌株,通过紫外诱变,采用琼脂块法筛选,获得了一株高产菌株SG-2002,摇瓶产量达到2.65g/L,为出发菌株的1.61倍.并通过与链霉素抗性筛选法进行比较分析,表明链霉素抗性不是纳他霉素高产的必要条件.确定了菌株SG-2002在5L发酵罐和200L发酵罐上的发酵工艺控制参数.在该工艺下,发酵96~144h,5L发酵罐最终纳他霉素产量达到5.1g/L,200L发酵罐最终纳他霉素产量达到了5.9g/L,比原始菌株摇床发酵产量提高了2.58倍.确定了纳他霉素的初提工艺,使纳他霉素回收率和纯度均达到80﹪以上.通过活性炭柱脱色对纳他霉素进行精制,产品纯度达到98﹪,回收率为12.1﹪.采用活性炭浸泡法,获得脱色条件:活性炭加入量为0.5﹪,在65℃下处理30min.在该工艺下,活性炭只对色素有吸收,对纳他霉素没有吸收,获得产品纯度达到91.6﹪,回收率为82.5﹪.对提纯样品进行了紫外光谱、高压液相色谱、抑菌活性、红外光谱和核磁共振图谱检测,证明该提纯样品为纳他霉素.测定了纳他霉素对部分霉菌和酵母的抑菌谱,发现纳他霉素对供试霉菌和酵母的最小抑制浓度在10ppm以下.
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