【摘 要】
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目的:研究生精细胞凋亡过程中eNOS和iNOS的表达及NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对生精细胞凋亡的抑制作用及凋亡相关基因表达的影响.方法:将42d龄雄性SD大鼠建立单侧
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目的:研究生精细胞凋亡过程中eNOS和iNOS的表达及NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对生精细胞凋亡的抑制作用及凋亡相关基因表达的影响.方法:将42d龄雄性SD大鼠建立单侧隐睾模型,48只大鼠随机分为隐睾组、隐睾+生理盐水组、隐睾+L-NAME组、假手术组,每组12只大鼠,模型建立按文献操作[1],戊巴比妥钠(50mg/Kg)腹腔内注射麻醉,下腹正中切口,隐睾组大鼠切断左侧睾丸引带,用5-0尼龙线将左侧睾丸固定于腹后壁后关腹,术后未注射任何药物;隐睾+生理盐水组及隐睾+L-NAME组大鼠左侧睾丸手术处理方法同隐睾组大鼠,术后分别腹腔内注射生理盐水或L-NAME,每天一次,定时定量(50mg/Kg),假手术组将左侧睾丸切断引带后还纳入阴囊关腹.术后第7天颈动脉放血处死动物,取血清于-70℃冻存,用放射免疫法测定血清内睾酮含量,硝酸还原酶法测定血清NOx含量;留取各组大鼠双侧睾丸称湿重,化学比色法测定睾丸组织中NOS活性;常规组织学切片观察各组左侧睾丸生精上皮形态;TUNEL原位末端标记法结合流式细胞术检测生精细胞凋亡;RT-PCR和免疫组化分别检测eNOS、iNOS、Bax和Bc1-2 mRNA及其蛋白表达的变化,分别应用凝胶分析系统和图象分析系统计算相对积分吸光度值和阳性细胞灰度值.结论:(1)L-NAME抑制隐睾生精细胞凋亡,NO促进隐睾生精细胞凋亡(2)隐睾内eNOS、iNOS和Bax表达增强,Bcl-2表达降低(3)L-NAME可促进Bcl-2表达,抑制Bax表达
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