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枣在我国具有得天独厚的自然条件,故枣资源极为丰富。世界上枣产量中90%以上的枣产于我国。近年来,对大枣药用有效成分的研究表明,大枣中含量最多、药用效果最明显、最有可能实现产业化生产和开发应用的大枣深加工产品当属大枣多糖。研究表明:多糖是红枣中重要的天然活性成分,具有保护肝脏和生津养血的功能,对抗氧化、抗衰老、抗辐射、提高抗体免疫力具有重要的作用,而对于大枣多糖抗凝血活性的研究目前尚未见诸报道。目前应用于临床治疗的抗凝血药物主要是肝素和香豆素类,有诱发血小板症等副作用。开发对心脑血栓疾病具有预防作用的新型药物或功能性食品具有重要的意义。本试验主要结果如下:1.大枣粗多糖能显著延长人体血浆的活化部分凝血活酶时间(APTT)值,而对凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)值均无明显影响,表明大枣粗多糖主要是通过内源性凝血系统发挥作用,且与浓度呈量效关系。2.实验比较的13个品种抗凝血活性差异显著,APTT值在49.4-74s间,其中,灵宝大枣的抗凝血活性相对较好,为74s。另外,大枣粗多糖的抗凝血活性强弱与其中性多糖、酸性多糖和蛋白质比例并没有明显的相关关系。3.比较了在热风干燥、真空冷冻干燥、微波辅助干燥、低温真空干燥四种大枣干制条件下,大枣粗多糖体外抗凝血活性的差异。其中,热风干燥、真空冷冻干燥的大枣干制方式能较好的保持大枣粗多糖的抗凝血活性,分别为125.6s和124.3s。超声提取、超声辅助酶法、微波提取和传统水提法中,超声提取方法所得的大枣粗多糖体外抗凝血活性最好,为98.6s。4.为了确定影响大枣粗多糖得率和抗凝血活性的因素条件,通过单因素试验进行比较,运用响应面分析方法,探讨了超声波提取大枣多糖的优化工艺。通过考察超声功率、超声时间、提取温度、料液比、pH对大枣多糖得率与抗凝血活性的影响,得到超声辅助提取大枣粗多糖的最佳工艺条件:超声温度69℃,pH值7.15,超声功率80W,料液比为1:10,超声时间30mmin。在此工艺条件下,得到的大枣粗多糖不仅得率较高(7.82%),而且也能较好的保持其对人体血浆的体外抗凝血活性(86.5s)。5.对大枣粗多糖进行纯化分离,并进一步研究其抗凝血活性的变化。用sevag法脱蛋白后的大枣粗多糖对人体血浆的体外抗凝血活性明显增强。经过AB-8大孔树脂层析后活性保持较好。大枣多糖通过DEAE-52纤维素柱进行分级,得到三个组分JPⅠ、JPⅡ、JPⅢ。其中,组分JPI占多糖总量的67.1%,是大枣多糖的主要组分。JPI的体外抗凝血活性显著高于其他两个组分,分子量为29922D。组分JPⅡ、JPⅢ之间活性差异不明显,分子量分别为41686D和54200D。6.将此三组大枣多糖级分进行SephadexG-100凝胶柱层析,得单一对称峰;通过紫外分光光度法测定,得单一对称峰;采用冻融分析得到透明的淡黄色液体,三个组分的高效液相色谱图也呈现出单一对称的峰形,由此证明JPⅠ、JPⅡ、JPⅢ为均一组分,可以对其抗凝血活性进行进一步研究。7.通过傅里叶红外光谱仪对组分JPⅠ、JPⅡ进行初步分析,发现两个组分都具有多糖的典型特征,都含有糖醛酸,是酸性多糖,同时,都含有β-D-吡喃葡萄糖环的结构。多糖JPⅡ中含有的酸性多糖的—COOH基团相对较高,也具有甘露糖的吸收峰。8.为了进一步提高大枣多糖的体外抗凝血活性,对大枣多糖JPⅠ、JPⅡ进行硫酸化修饰后,多糖分子链上的羟基引入硫酸基团,导致多糖的负电荷增加,体外抗凝血活性明显增强。