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微小RNA（microRNA，miRNA/miR）是一类19-25个核苷酸组成的非编码小RNA，能与靶mRNA互补配对调节基因表达，导致翻译抑制或mRNA降解。因其在肿瘤发生、发展过程中扮演的促癌/抑癌因子的作用，miRNA受到越来越多的关注。目的：分析miR-200c在乳腺细胞株及乳腺病变组织中的表达；筛选miR-200c调控的基因网络与信号通路。方法：实时荧光定量RT-PCR方法检测12个乳腺细胞株中miR-200c的表达；原位杂交方法分析miR-200c在不同乳腺疾病中的表达；mRNA表达谱生物芯片与生物信息学软件对miR-200c mimic转染的4个乳腺癌细胞株mRNA表达芯片数据进行分析，筛选差异表达基因及其相关信号通路；免疫组化验证miR-200c预测靶点EDNRA在乳腺疾病组织芯片中的表达。结果：1)实时荧光定量RT-PCR结果显示，4个高度恶性乳腺癌细胞株（BT549、HS578T、MDA-MB-231、SUM159PT）中miR-200c的表达较6个低度恶性细胞株（BT474、MCF7、MDA-MB-468、SKBR3、T-47D、ZR-75-1）和永生化正常乳腺上皮细胞株（MCF10A、MCF12A）中为低（p<0.01）。2)乳腺疾病组织芯片原位杂交结果显示，36例正常与良性乳腺病变中，27例表达阳性；36例乳腺癌中，18例表达阳性。miR-200c的表达在正常、良性乳腺病变组织中的表达明显高于乳腺癌（p=0.028）。3) mRNA表达谱芯片分析结果显示，与mimic control转染组比较，miR-200cmimic转染的BT549、HS578T、MDA-MB-231和SUM159PT细胞株中分别有1160、1731、1579和1630个基因表达下调（倍数值≤-1.25）。任意3个转染细胞株中的共下调基因与5个miRNA调控靶点分析系统（TargetScan6.2、miRDB、PicTar、microrna.org和DIANA LAB）预测的miR-200c调控基因综合比较，获得45个交集基因。4)生物信息学分析显示45个差异表达基因相关信号通路包括G13信号通路、突触传递（synaptic transmission）信号通路、神经冲动传递（transmission ofnerve impulse）信号通路、转录负调控（negative regulation of transcription）信号通路和细胞内代谢负调控（negative regulation of cellular metabolism）信号通路等；不同的信号通路可以通过共调基因相互联系；在特定的信号通路中，共调基因间也存在密切的相互联系。5) miR-200c预测靶蛋白EDNRA免疫组化分析显示，36例乳腺癌标本中17例表达阳性（47.22%），明显高于癌旁正常组织与良性乳腺病变中EDNRA的阳性表达（16.67%），其表达量与乳腺病变恶性度相关（p=0.005）。部分组织切片的EDNRA免疫组化与原位杂交结果相互比较，发现EDNRA的表达与miR-200c的表达相反，提示EDNRA可能是miR-200c的调控靶点。结论：1)相较于正常、低度恶性细胞株，miR-200c的表达在高度恶性乳腺癌细胞株中明显下调。2) miRNA原位杂交方法在组织标本上的应用，能定性并半定量反映miRNA的表达情况。乳腺疾病组织芯片的miR-200c原位杂交分析结果提示其可能参与乳腺癌病变的发生、发展。3)以高通量生物芯片分析为基础，运用生物信息学手段，建立的多元化筛选乳腺癌恶性表型相关miR-200c调控的基因网络与信号通路的方法，为后续广泛而深入的机制研究提供了便利。