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目前我国胃癌新增病例和死亡人数均居世界首位。肿瘤细胞的上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transitions，EMT）与侵袭转移行为密切相关。近年来，多项研究表明转录因子叉头框Q1（FOXQ1）在肿瘤EMT过程中发挥重要作用。在胃癌中，FOXQ1高表达被证实与与肿瘤大小、分期和淋巴结转移密切相关，且为胃癌预后差的一个独立预后因子。然而FOXQ1在胃癌中的生物学功能及自身高表达的机制未明。基因信息学提示，miR-1271可与FOXQ1基因的3’UTR靶向结合。然而，miR-1271在胃癌中未见报道。因此，本研究拟分别探讨FOXQ1和miR-1271在胃癌中的生物学功能，并验证miR-1271通过直接靶向调控FOXQ1发挥生物学功能。本研究分三个部分。 第一部分：探讨FOXQ1对胃癌细胞增殖、侵袭和EMT的影响。 目的：探讨FOXQ1对胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化（EMT）的影响。 方法：根据FOXQ1基因构建FOXQ1 siRNA，采用MTT法和平板克隆实验检测胃癌细胞增殖能力，Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力，实时荧光定量 PCR和Western blot法检测FOXQ1、上皮间质标记物E-cadherin、间皮标志物N-cadherin和Vimentin的表达。 结果：FOXQ1 siRNA能够沉默MGC-803胃癌细胞FOXQ1基因；FOXQ1 siRNA能够抑制MGC-803胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭、并上调E-cadherin的表达和下调N-cadherin和Vimentin的表达。 结论：下调FOXQ1表达能够抑制胃癌细胞增殖、侵袭和EMT。 第二部分：探讨miR-1271在胃癌中的表达及其生物学功能研究，miR-1271的表达与胃癌临床病理特征的关系。 目的：探讨miR-1271在胃癌中的表达及其生物学功能研究，以及miR-1271的表达与胃癌临床病理特征的关系。 方法：选用胃癌手术切除标本60例，每例标本均选用癌组织及癌旁组织对照。采用MTT法和平板克隆实验检测胃癌细胞增殖能力，Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力，实时荧光定量PCR和Western blot法检测miR-1271、上皮间质标记物E-cadherin、间皮标志物N-cadherin和Vimentin的表达。 结果：在60例胃癌患者中，胃癌组织与癌旁组织的miR-1271相对表达量高者为15例，低表达者为45例；与人正常胃黏膜细胞GES1相比，miR-1271在胃癌细胞株SGC-7901（P<0.05）、AGS（P<0.01）、以及MGC-803（P<0.01）中的表达显著下降；miR-1271 mimics可抑制MGC-803胃癌细胞的增殖、迁移侵袭，并上调E-cadherin的表达和下调N-cadherin和Vimentin的表达；miR-1271抑制剂促进SGC-7901胃癌细胞的增殖、迁移侵袭，并下调 E-cadherin的表达和上调 N-cadherin和Vimentin的表达；在60例胃癌患者的组织标本中，miR-1271的表达与肿瘤大小（P=0.017）、T分期（P=0.035）、N分期（P=0.018），以及临床分期（P=0.025）呈负相关。 结论：miR-1271在胃癌组织和细胞系中低表达；高表达 miR-1271可以抑制胃癌细胞增殖、侵袭和EMT；miR-1271在胃癌组织中的表达与肿瘤大小、T分期、N分期，以及临床分期呈负相关。 第三部分：验证miR-1271通过直接靶向FOXQ1抑制胃癌细胞增殖、侵袭及EMT，验证二者在临床标本中的相关性。 目的：为验证FOXQ1是miR-1271的靶基因，并参与miR-1271抑制MGC-803胃癌细胞增殖、侵袭和EMT的生物学功能，验证 miR-1271和FOXQ1表达在临床标本中的相关性。 方法：参考miRNA靶基因预测数据库TargetScan和Miranda找到候选 miRNA，选用胃癌手术切除标本50例，每例标本均选用癌组织及癌旁组织对照。采用MTT法和平板克隆实验检测胃癌细胞增殖能力，Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力，实时荧光定量PCR和Western blot技术检测miR-1271、上皮间质标记物E-cadherin、间皮标志物N-cadherin和Vimentin的表达，使用荧光素酶报告基因方法验证靶基因。 结果：miRNA靶基因预测数据库TargetScan和Miranda均预测miR-1271可与FOXQ1基因的3’UTR靶向结合；双荧光素酶报告基因结果证实FOXQ1是miR-1271的靶基因；在胃癌细胞系中，上调miR-1271可下调FOXQ1的表达，而下调miR-1271可上调FOXQ1的表达；miR-1271 mimics可抑制MGC-803胃癌细胞增殖、侵袭和EMT，而miR-1271mimics+FOXQ1-no UTR可以部分逆转miR-1271 mimics产生的抑制效应，即FOXQ1过表达可以部分逆转 miR-1271对胃癌细胞的抑制效应；在50例胃癌患者组织标本中，miR-1271和FOXQ1 mRNA表达呈负相关（R=-0.67，P＜0.01）。 结论：FOXQ1是miR-1271的靶基因，miR-1271可通过直接靶向下调 FOXQ1的表达抑制胃癌细胞增殖、侵袭和EMT。在临床胃癌标本中，miR-1271和FOXQ1 mRNA表达呈负相关。