基于数据挖掘探究高天舒教授辨治Graves病的组方规律及血液蛋白质组学研究

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目的:基于数据挖掘技术分析高天舒教授治疗Graves病的配伍规律,并利用血液蛋白质组学技术探究含富碘中药滋阴降火散结方治疗Graves病的潜在作用机制。材料与方法:第一部分收集2020年9月至2021年10月于辽宁中医药大学附属医院内分泌科门诊就诊的85例经高天舒教授诊治的Graves病患者。将病例信息录入“中医传承计算平台V3.0”软件中,通过中医传承计算平台的数据统计模块进行数据处理与分析,进而统计85位患者的证候;处方中的药物种类、四气、五味、归经;药物单品的使用频次;分析药物之间的关联规则、分析核心处方。第二部分研究根据第一部分研究得出的最常见的证型继续筛选该证型的Graves病患者,并对患者进行为期一个月的单纯中药复方治疗,收集患者的基本信息、治疗前后的实验室检查结果及甲状腺超声结果,并采用血液蛋白质组学技术对患者治疗前后的血液进行对比分析以评价含富碘中药复方干预后血液蛋白的差异表达情况。结果:1.临床Graves病出现的证型最多见为阴虚火旺痰凝证、其次心肝火旺证、气阴两虚证。应用中药的种类频次前5类由多到少依次为清热类、化痰止咳平喘类、补虚类、平肝熄风类、活血化瘀类。药物四气统计频次中,“寒”性药物使用频次最高,其次分别为“平”性药物和“温”性药物,在归经分类中,以入肝经的药物最多。百合、知母、夏枯草、白花蛇舌草、生地黄、玄参、浙贝母、牡蛎、海藻、昆布是高天舒教授治疗Graves病遣方用药的经典规律。2.未使用ATDs的患者在接受为期1个月的含富碘中药滋阴降火散结方治疗后,血清FT3、FT4、TRAb、甲状腺体积、甲状腺上动脉血流速度峰值较治疗前显著下降,血清TSH水平显著上升,血清Tg Ab、TPOAb水平较治疗前未见统计学差异。3.起始治疗前的GD患者与健康对照组相比,106个蛋白显著高表达,93个蛋白显著低表达;经一个月含富碘中药滋阴降火散结方干预后的GD患者与健康对照组相比,58个蛋白显著高表达,45个蛋白显著低表达;经含富碘中药滋阴降火散结方干预后的GD患者与接受治疗前相比,36个蛋白显著高表达,31个蛋白显著低表达。根据生物信息学分析结果,生物进程分类中差异表达蛋白质功能主要涉及到细胞进程、生物功能调节、应激反应、多细胞有机体过程、定位功能、发育过程、代谢进程、信号转导、免疫进程、生物附着、多器官进程、细胞迁移等;在细胞组成分类中差异表达蛋白质主要位于细胞、细胞内、含蛋白质复合物等部位;在分子功能分类中差异表达蛋白主要有蛋白结合、催化活性、分子转导活性、结构分子活性、信号传导活性、蛋白质折叠伴侣等功能。COG/KOG分类结果提示差异蛋白功能分类主要集中在信号转导机制(13个差异蛋白),翻译后修饰、蛋白转运、分子伴侣(8个差异蛋白),细胞骨架(5个差异蛋白)和能量生产和转换(5个差异蛋白)。GO富集提示在生物学进程中富集性最显著的是对环磷酸腺苷(c AMP)的反应性、对白介素-6的反应性、细胞内转运负调控以及对睾酮的反应性;在细胞组成中富集较为显著的是酶原颗粒、多核糖体、兴奋性突触和内质网膜腔侧;在分子功能中富集较为显著的是类固醇激素受体结合、细胞核激素受体结合、激素受体结合、嘌呤核苷三磷酸结合等。KEGG富集提示差异表达蛋白与c AMP信号通路、幽门螺杆菌感染中的上皮细胞信号转导、胃酸分泌、心肌细胞肾上腺素能信号传导、c GMP-PKG信号通路、神经轴突导向有关。结论:1.GD患者中以阴虚火旺痰凝证、心肝火旺证和气阴两虚证为主,而又以阴虚火旺痰凝证的患者最为常见。故临床治疗时应该审证求因,牢牢把握滋阴降火散结之治疗大法。2.含富碘中药滋阴降火散结方可通过多个靶点、多条通路影响Graves病的发生发展进程,Rap1b蛋白可能是含富碘中药滋阴降火散结方发挥治疗作用的潜在靶点。
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