光谱分析在蛋白质和药物分析中的应用

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本文主要研究了共振光散射光谱法与分子荧光光谱法在蛋白质以及药物分析中的应用,内容包括以下四个方面:(1)利用氯金酸与葡萄糖之间的氧化还原反应所导致的光散射信号增强,对糖尿病人的血糖含量进行了测定。结果表明,由于金纳米粒子的生成,体系反应后在560.0nm附近出现最大散射峰,通过普通荧光分光光度计便能对其进行定量分析。该体系的线性范围为2.0-250.0μmol/L,检出限为0.21μmol/L。此外,对该体系做了一定的机理研究,并得出结论:活化能为34.8kJ/moL,葡萄糖和氯金酸的最佳反应比为3∶2。(2)讨论了10余种氨基酸和氯金酸的反应,发现在pH 1.98条件下,只有色氨酸能与氯金酸发生氧化还原反应并生成金纳米粒子。由于该反应具有良好的选择性,从而建立了一种新的检测色氨酸含量的方法,其线性范围为0.21-60.0mmol/L,检出限为21.3μmol/L。选择复方氨基酸注射液作为实际样品,用此法测得其中的色氨酸含量与标签浓度吻合。(3)利用对氨基苯磺酸能与邻苯二甲醛为原料,合成了一种新的席夫碱染料。该染料颜色鲜艳,最大吸收峰位于344.0nm,在pH 4.2条件下,能与血清蛋白相结合并导致共振光散射信号增强。由于共存物质对体系的干扰不大,该染料能用于血清蛋白的定量测定,结果表明:使用这一方法检测HSA与BSA所得的的检出限(3σ)分别为0.09×10-4mol/L和25.0×10-4mol/L,实际样品的测定结果和药典方法(CBB G250检测法)一致。(4)研究了卡托普利、邻苯二甲醛与异亮氨酸三者之间的反应,发现在pH 9.5条件下,该体系能生成以340.0nm激发,最大发射峰在452.0nm处的具有很强荧光的异吲哚。由此,建立了一种新的卡托普利检测方法,其线性范围为5.0-1000.0nmol/L,检出限为0.68nmol/L。此外,对卡托普利药片与尿样进行了含量测定,回收率分别为90.5-96.8%和95.3-104.9%。
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