髓系细胞触发受体-1在实验性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的表达研究

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目的:蛛网膜下腔出血(SAH)是严重的脑血管疾病之一,具有高死亡率及致残率,近年来认为早期脑损伤(EBI)是导致SAH患者预后不佳的主要原因,在EBI中炎症反应起关键的作用。而髓系细胞触发受体-1(TREM-1)被认为是炎症发生和放大的关键介质,可能参与EBI过程中的炎症反应,之前研究初步发现在SAH患者的脑脊液(CFS)中可溶性TREM-1(sTREM-1)浓度增加,但是TREM-1表达规律尚不清楚,因此,本研究将进一步检测在实验性SAH后EBI中TREM-1的表达,观察TREM-1在SAH后EBI时间窗内不同时相大鼠脑组织中的表达及研究TREM-1与炎症因子和神经功能学评分的相关性,探索TREM-1在EBI形成过程中的作用,为防治EBI提供新靶点。方法:采用颈内血管穿刺法制备SAH模型,所有模型术后均评估出血严重程度及神经功能学评分。首先将12只大鼠随机分成假手术组及SAH组,造模后24h用免疫组织化学方法测定脑组织中TREM-1的表达。后将48只大鼠随机分成假手术组及6h,12h,24h,48h和72h 5个不同时相组,造模后分别取脑脊液备用及脑组织通过蛋白质印迹进一步分析TREM-1水平动态变化。然后在TREM-1表达水平峰值的时间点,通过酶联免疫吸附试验法测定该时间点大鼠CSF中TNF-α和IL-1β水平,最后分析TREM-1表达与TNF-α和IL-1β水平及神经功能学评分之间的相关性。结果:1.采用免疫组织化学法分析显示在大鼠SAH后24h时TREM-1阳性细胞数与假手术组比较表达明显增加(2.67±0.82 vs 0.83±0.41),具有统计学意义(P<0.05)。2.采用蛋白印迹法分析结果显示在大鼠SAH后EBI时间窗内5个不同时相TREM-1的表达水平存在动态变化,在SAH后6h开始增加并且在48h达到峰值,但在12h至72h之间TREM-1蛋白表达显着高于假手术组,具有统计学意义(P<0.05)。3.相关性分析显示TREM-1的产生与TNF-α(r=0.726,P=0.041<0.05)和IL-1β(r=0.711,P=0.048<0.05)表达呈正相关,与神经功能学评分呈负相关(r=-0.743,P=0.035<0.05)。结论:在实验性SAH后EBI脑组织中TREM-1表达呈动态变化,且于48小时达高峰,与炎症严重性和神经功能学评分相关,表明TREM-1可能与SAH后EBI炎症级联反应有关。
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