鸡作为我国传统养殖的家禽,已经有数千年历史。随着饲养的进步和社会需求增大,密集化养殖的优点日益突出,但与此同时引起鸡发病率上升的问题也不容忽视。脾脏作为鸡内体最大的外周免疫器官,相关的研究较少。本文在研究鸡脾脏白髓的结构特征的基础上,分离外周血淋巴细胞并用荧光素羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(5,6-carboxy fluoresceindiacetate succinimidyl ester,CFSE)对其进行标记。以示踪其在脾脏中归巢的过程,探讨鸡淋巴细胞在脾脏归巢的意义,为鸡病的防治提供一定的理论依据·具体研究内容和结果如下:1.鸡脾脏白髓的结构特征脾脏作为鸡的主要免疫器官之一,其内在显微结构特征的研究具有重要意义。通过观察鸡脾脏椭球及笔毛微动脉的结构特征,探讨其与免疫反应的相关联系。应用光镜技术观察、研究鸡脾脏椭球结构,发现椭球内的笔毛微动脉内皮为立方高柱状内皮,细胞连接不紧密,并有淋巴细胞出现在椭球壁中·推断椭球中的笔毛微动脉可能是鸡淋巴细胞在脾脏发生归巢的场所。2.鸡外周血淋巴细胞的分离及CFSE标记随着研究技术的改进,有关细胞体内示踪的方法增多,其中利用CFSE标记来进行细胞体内示踪试验的效果较好。本试验应用梯度离心与CFSE荧光标记技术,对外周血淋巴细胞进行荧光标记。发现利用人淋巴分离液可以有效的分离鸡外周血淋巴细胞,CFSE标记外周血淋巴细胞活力良好,形态正常,荧光显微镜下可见大部分被标记细胞发出绿色荧光,阳性标记率高达98%。说明梯度离心分离外周血淋巴细胞确实可行,使用荧光染料CFSE进行活细胞体内示踪是一种稳定的示踪方法。3.鸡脾脏淋巴细施归巢示踪的相关研究将被标记的淋巴细胞注入鸡体内后,发现其中部分位于脾脏红髓,部分位于椭球周围淋巴鞘(PELS)内部或者附近。另外,观察到少部分淋巴细胞位于白髓椭球中央。试验结果表明被荧光标记的淋巴细胞能进入脾脏白髓内,鸡脾脏确实存在淋巴细胞归巢现象,并且与鞘毛细血管外的椭球密切相关。