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【目的】探讨转录因子阴阳1(YY1)在类风湿关节炎(RA)发病中的作用及其介导RA发病的免疫学机制,为临床靶向YY1治疗RA提供新思路。【方法】30例RA患者和30例骨关节炎(OA)患者来自于福建医科大学附属第一医院风湿血液科门诊就诊的患者,25例健康对照来自于福建医科大学附属第一医院体检中心的健康人群,提取上述患者的外周血单个核细胞的总RNA,并逆转录为cDNA,应用western blot技术检测三组人群中YY1蛋白的表达量,同时利用实时荧光定量PCR技术检测YY1及炎症因子IL-6的相对表达量。27只雄性DBA小鼠来自福建医科大学动物实验中心,构建胶原诱导关节炎(CIA)小鼠模型,并通过尾静脉向CIA小鼠分别注射了YY1过表达慢病毒(LV-YY1),YY1干扰慢病毒(LV-YY1-shRNA1,LV-YY1-shRNA2)和慢病毒载体(LV-NC),应用western blot技术检测CIA小鼠的脾脏、淋巴结中YY1蛋白的表达量,实时荧光定量PCR检测不同慢病毒处理过的四组CIA小鼠外周血中YY1的相对表达量,并通过炎症评分和病变关节HE染色来判断CIA小鼠的炎症水平。采用PathArray芯片检测LV-YY1-shRNA和LV-YY1处理过的PBMC的基因表达。利用JASPAR软件预测IL-6启动子区的YY1结合位点,通过双荧光素酶报告实验和染色质免疫共沉淀实验判断转录因子YY1与IL-6启动子区的结合情况,流式细胞术检测CD4+T细胞亚群的比例和数量。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,YY1的相对表达量在RA患者的外周血单个核细胞中显著高于OA患者和健康人(P<0.05),同样,YY1的表达水平在CIA小鼠的脾脏和淋巴结中也显著高于对照小鼠。相关性分析显示在RA患者中,YY1与炎症因子IL-6呈正相关(R~2=0.5099);在CIA小鼠的脾脏与淋巴结中,YY1与IL-6表达均呈正相关(R~2=0.6262,R~2=0.6326)。Western blot结果显示,YY1的表达量在RA患者外周血单个核细胞中和CIA小鼠的脾脏与淋巴结中,均明显高于各自的对照组(健康人,DBA小鼠)。炎症评分结果表明LV-YY1-shRNA2处理的CIA小鼠炎症评分显著低于对照组(P=0.034),病理切片也显示该组小鼠的炎症细胞浸润下降,骨和软骨的破坏程度减轻。PathArray芯片分析结果显示YY1干扰后,IL-6信号通路受到显著抑制。JASPAR软件预测发现IL-6启动子区可能存在转录因子YY1的结合位点。双荧光素酶活性检测结果表明pGL3-basic-IL-6-2.0 kb的荧光素酶活性较高。染色质免疫共沉淀实验结果表明,IL-6启动子-1257 bp至-1249 bp和-1480 bp至-1472 bp中存在YY1结合的位点。干扰YY1表达后,IL-6的表达减少,同时TH17细胞的比例减少。【结论】YY1在RA患者中的表达升高,与RA的炎症反应和关节破坏有关。干扰YY1的表达可减轻CIA小鼠的炎症和改善关节破坏。YY1主要是通过与炎症因子IL-6的启动子区结合促进IL-6的转录表达,进而促进TH17细胞分化,从而导致RA发病。靶向YY1可为临床发展RA治疗新手段提供新思路。