拟南芥含MATH结构域基因AtSb10功能的初步研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jianghulong007
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目前,在植物领域,含MATH结构域基因的功能研究报道很少。AtSb10是含MATH结构域基因家族中的一个成员,具有两个连续MATH结构域,但是有关AtSb10基因的其它信息如表达谱、功能等都未知。本文借助生物信息学、分子生物学、基因工程相关技术对AtSb10基因进行了初步的研究,主要成果如下:1、生物信息学分析结果表明,AtSb10基因位于拟南芥3号染色体上,基因全长1818bp,包含了6个外显子和5个内含子,编码373个氨基酸;两个MATH结构域分别位于第88位到第220位、第242位到第365位氨基酸。2、采用RT-PCR方法分析了AtSb10基因的表达谱,结果显示该基因在拟南芥成熟植株的根中有表达。3、扩增得到AtSb10基因的启动子,构建了PBI101-AtSb10p::GUS融合表达质粒,转化拟南芥野生型植株,得到7株转基因苗。对其进行GUS组织化学染色后发现,AtSb10基因不仅在拟南芥根中有表达,在幼苗芽的部位也有表达。4、筛选得到了AtSb10基因T-DNA插入突变纯合子,RT-PCR检测sbl0不表达,说明AtSb10基因被有效沉默。5、构建了pCAMBIA1300-35S::AtSb10超表达质粒,转化Col-0得到10株转基因苗。RT-PCR检测结果显示AtSbl0基因在茎、叶、花、果荚和根中都有表达,且过表达植株根中的表达量高于Col-0根中的表达量。6、比较了AtSb10基因T-DNA插入突变体、过表达植株和Col-0植株的根长、根形态表型,结果显示差异不明显。7、在不同盐浓度胁迫条件下,对三种材料种子的萌发率进行观察,结果显示相较于野生型,T-DN A插入突变体种子的萌发率更高,过表达植株种子的萌发率更低。
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