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目的:本实验采用出生后14天内SD大鼠左侧坐骨神经支配区皮下注射抗脑源性神经营养因子血清(anti-BDNF)中和内源性BDNF的方法,检测出生后坐骨神经纤维的髓化情况及p75和NF-<,k>B的表达,同时观察背根节感觉神经元和脊髓前角运动神经元p75的表达,从而探讨内源性BDNF对出生后SD大鼠周围神经髓化的影响及其作用机制。
方法:健康新生SD大鼠60只(体重10±1.5g),随机分为3组:实验组(anti-BDNF组)左侧坐骨神经支配区按10mg/kg.wt2次/周皮下注射(s.c.)注射anti-BDNF血清(n=20)。实验对照组1(NSIg组)注射等量正常羊血清(n=20);实验对照组2(NS组)注射等量生理盐水(n=20);动物分别存活3天、14天。用光镜和电镜方法检测出生后3天、14天左侧坐骨神经纤维的髓化情况:用western-blot方法检测出生后3天左侧坐骨神经p75的表达;用免疫荧光方法检测出生后3天左侧坐骨神经雪旺细胞内NF-<,k>B的表达;用免疫组织化学方法检测出生后3天和14天与左侧坐骨神经相连的背根节感觉神经元和脊髓前角运动神经元p75的表达。
结果:出生后3天,与对照组相比,实验组左侧坐骨神经髓化的神经纤维数目减少,p75表达下调,雪旺细胞内NF-<,k>B核转移率下调,同时与左侧坐骨神经相连的背根节感觉神经元和脊髓前角运动神经元p75表达下调;出生后14天,与对照组相比,实验组左侧坐骨神经出现较多的髓化异常,同时与左侧坐骨神经相连的背根节感觉神经元和脊髓前角运动神经元p75表达下调。出生后14天对照组与左侧坐骨神经相连的背根节感觉神经元和脊髓前角运动神经元p75的表达较3天时下调。
结论:1.内源性BDNF影响出生后大鼠周围神经的髓化,尤其在早期作用明显。2.内源性BDNF通过p75和NF-<,k>B信号途径调节出生后大鼠周围神经的髓化。3.内源性BDNF可能调节神经元表达的p75从而调节出生后大鼠周围神经的髓化。