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第一部分妊娠期糖尿病对胎盘炎症因子的影响目的：研究妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus, GDM）患者胎盘合成释放炎症因子改变,明确高糖环境对胎盘滋养细胞合成释放炎症因子的影响。材料和方法：获取临床妊娠期糖尿病和正常对照组（Control, C）胎盘组织,采用实时定量PCR、酶联免疫吸附试验检（ELISA）测胎盘炎症因子合成释放改变。体外以生理糖浓度（5mmol/L）和高糖环境（25mmol/L）培养人类滋养细胞系（HTR8/SVneo）48h再加脂多糖（lipopolysaccharide, LPS,1μg/ml）刺激24h,酶联免疫吸附试验检测上清炎症因子释放。结果：GDM组胎盘较C组相比,抗炎因子脂联素（Adiponectin, ADIPOQ）、白细胞介素5（Interleukin5, IL5）、白细胞介素13（Interleukin13, IL13）信使RNA （message RNA, mRNA）表达下降（p<0.05）,促炎因子白细胞介素6（Interleukin6, IL6）、白细胞介素8（Interleukin8, CXCL8） mRNA表达增加（p<0.05）,且白细胞介素6（Interleukin6, IL-6）在蛋白水平合成增加（p<0.05）。体外实验高糖培养人类滋养细胞系,结果其释放IL-6增加（p<0.05）,Adiponectin减少（p<0.05）。结论：高糖是引起胎盘和人类滋养细胞合成释放炎症因子发生改变,炎症反应亢进的主要原因。第二部分妊娠期糖尿病对小鼠胎鼠胰腺Igf2表达的影响及调控机制目的：研究宫内高糖环境下小鼠胎盘炎症反应改变及胎鼠胰腺胰岛素储备功能、印记基因Igf2表达、Igf2差异甲基化区（differentially methylated region, DMR）的甲基化状况及相关甲基化调节酶的改变,分析糖尿病发病相关基因的表达差异及可能的调节机制。材料和方法：建立妊娠期糖尿病小鼠模型,在孕18.5天取出对照组（F1-Control）与实验组（F1-GDM）胎盘、胎鼠胰腺（fetal mouse pancreas, FMP）进行比较,实时定量PCR检测胎盘炎症因子表达、胎鼠胰腺胰岛素、印记基因Igf2、甲基化调控相关酶Dnmt1、Dnmt3a、Trim28、Tet1、Aicda表达,免疫组化观察GDM胎鼠胰腺内胰岛素合成情况,并用MassARRAYTM EpiTYPER定量甲基化平台对Igf2甲基化水平进行分析。结果：宫内高糖环境的子一代胎盘白细胞介素6（Interleukin6,I16）表达增加（p<0.05）,胰腺胰岛素表达合成减少（p<0.05）,印记基因Igf2表达下降（p<0.05）,Igf2DMR2区5个CpG位点甲基化程度较对照组明显增高（p<0.05）,胚胎发育期甲基化维持重要相关酶Dnmt1、Trim28表达上调（p<0.05）,去甲基化相关酶Aicda表达下降（p<0.05）。结论：宫内高糖可致小鼠胎盘116表达改变,是引起胎盘炎症环境改变的主要原因。同时胎鼠胰腺印记基因Igf2表达降低,可能是胎鼠胰岛素储备功能受损的原因之一。宫内高糖环境胎鼠胰腺Igf2DMR2高甲基化状态是引起Igf2表达降低的主要机制。胎鼠胰腺甲基化稳态关键酶Dnmt1、Trim28表达升高及Aicda表达降低,是胰腺印记基因Igf2甲基化水平改变的主要原因。第三部分白细胞介素6和高糖对胎鼠胰腺的影响目的：探索宫内改变环境中影响胎鼠表观遗传变化的主要原因及其可能机制。材料和方法：体外原代培养孕18.5天胎鼠胰腺组织C （glucose5mmol/L）, C+IL-6（glucose5mmol/L+IL-64000pg/ml）, HG （glucose25mmol/L）, HG+IL-6（glucose25mmol/L+IL-64000pg/ml）48h后,利用实时定量PCR检测这四组胰腺印记基因Igf2、胰岛素、Dnmt1、Trim28、Aicda表达改变,免疫荧光观察不同培养条件下胎鼠胰腺内胰岛素合成情况,再次利用MassARRAYTM EpiTYPER定量甲基化平台对Igf2甲基化水平进行分析。结果：IL-6或HG培养均可使胎鼠胰腺胰岛素合成减少（p<0.05）,Igf2表达降低（p<0.05）, Dnmt1、Trim28表达升高（p<0.05）,其中IL-6对胰岛素、Igf2、Dnmt1的作用更为明显,而HG对于Trim28的作用更为显著,Aicda表达没有显著差异（p>0.05）。IL-6或HG对Igf2DMR2区有4个CpG位点在IL-6或HG培养条件下出现高甲基化（p<0.05）,其中IL-6对CpG5、CpG7、CpG11的作用更为明显,而HG对于CpG4的作用更为显著,结论：高糖和高IL-6对胎鼠胰腺Igf2表达和Igf2DMR2甲基化状态均有影响,IL-6主要是通过上调Dnmt1,高糖是主要通过影响Trim28使得Igf2DMR2甲基化水平升高的,并成为引起胎鼠胰腺功能损伤及出生后长期不良结局的的机制之一。