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目的:观察分析成年正常野生型小鼠及不同发病阶段G93A-SOD1 ALS转基因小鼠脑相关解剖区NPCs的增殖、迁移、分化情况,为进一步调控NPCs的增殖、定向迁移、分化提供理论依据,为治疗ALS提供可能途径。方法:构建G93A-SOD1 C57BL/6J转基因小鼠动物模型,用PCR技术检测筛选转基因小鼠动物模型。将G93A-SOD1转基因小鼠分为未发病阶段(60-70天),发病阶段(90-100天)和进展阶段(120-130天)。腹腔注射Brdu(5-溴脱氧尿核苷)标记野生型和G93A-SOD1 C57BL/6J转基因小鼠增殖的新生细胞。采用荧光免疫组织化学双标技术,用NPCs生物学标志物(Nestin,Vimentin)标记NPCs,用Brdu标记增殖的新生细胞,用NeuN标记神经元细胞,用GFAP标记星形胶质细胞,用Olig标记少突胶质细胞。在显微镜同一视野、同一放大倍数下,用图像处理技术将不同染色的阳性细胞两两叠加成像,观察是否存在共免疫反应。统计不同发病阶段不同解剖区阳性细胞数量,观察阳性细胞分布特征。分析野生型和G93A-SOD1转基因小鼠脑相关解剖区NPCs增殖、定向迁徙、分化特征。结果:1、VCCs广泛分布于成年野生型小鼠脑的多个部位,包括室管膜区、室管膜下区、海马、大脑皮层、嗅球。2、G93A-SOD1 ALS转基因小鼠脑干腹侧多个核团出现VCCs的表达,随着疾病的进展,VCCs阳性细胞数进行性增多,存在进展组>起病组>未发病组的规律。3、脑干增多的VCCs几乎全与GFAP存在共免疫反应性,提示VCCs几乎全部分化成星形胶质细胞。4、与正常对照相比,G93A-SOD1 ALS转基因小鼠的嗅皮层、扣带回、运动皮层的VCCs数量减少。5、增多的VCCs极少数BrdU阳性,提示增多的VCCs可能有两种来源:1)少数与BrdU存在共免疫反应的VCCs为增殖的新生细胞;2)大多数与BrdU不存在共免疫反应的VCCs可能是增殖分化晚期的NPCs,这部分VCCs也有可能是从其他部位迁移分化而来。6、在G93A-SOD1 ALS转基因小鼠脑桥与延髓,所有nestin阳性细胞均表达Vimentin,仅有一部分Vimentin阳性细胞与nestin存在共免疫反应,说明VCCs大部分是分化晚期的NPCs。结论:正常成年野生型小鼠脑内多个部位广泛存在大量NPCs。ALS的发病刺激NPCs在脑干腹侧多个核团大量增殖,小部分处于增殖早期,大部分处于增殖分化晚期,并大多分化为星形胶质细胞。