目的:本课题研究工作基于转录组测序进行数据分析。目的一:筛选气郁质受试者的差异表达基因,应用生物信息学方法,对差异基因进行基因功能分析和通路富集分析;目的二:采用针刺干预气郁质受试者,并进行转录组测序分析,比较针刺干预前后的基因差异表达特征,初步揭示气郁质相关差异表达基因的功能,探讨针刺干预气郁质的起效机制。方法:1.2020年10月至2021年8月于山东中医药大学附属医院治未病中心招募符合纳入标准的气郁质者31例及平和质者30例。根据体质类型分为气郁质组和平和质组,并对两组受试者空腹外周血进行转录组测序分析。以平和质组为对照,筛选气郁质组的差异表达基因,并进行差异表达基因的功能富集分析和信号通路富集分析;2.对气郁质组的31例受试者进行针刺干预。针刺百会、印堂、神门、太冲、内关、膻中,每次30min,每周3次。治疗8周后,对其空腹外周血进行转录组测序分析。与干预前进行对照分析,筛选针刺干预后的差异表达基因,并进行生物信息学分析,筛选出针刺干预气郁质的功能基因及作用通路。结果:1.气郁质组与平和质组对比,筛选出气郁质组差异表达基因共308个,其中表达上调基因285个,表达下调基因23个。生物信息学分析显示气郁质差异表达基因显著富集在甲状腺激素合成及代谢过程、糖胺聚糖结合、细胞黏附分子、细胞外基质、趋化因子、轴突导向、PI3K-Akt信号通路、TGF-β信号通路、c AMP信号通路等。基因集富集分析（GSEA）补充得到血清素转运、对皮质酮的反应、乙酰胆碱受体活性、对乙酰胆碱的反应、乙酰胆碱门控通道复合物、G蛋白偶联乙酰胆碱受体信号通路等。通过蛋白质-蛋白质相互作用（Protein-Protein Interaction,PPI）分析得到APLNR、SPARCL1、CLDN16、ADAMTS15、CNTN4等种子节点基因。2.针刺干预前后对比,气郁质积分、SDS积分、HAMD积分、HAMA积分、PSQI积分均有明显降低,变化具有显著统计学意义（P＜0.001）。通过转录组测序筛选出针刺干预后的差异表达基因共313个,其中表达上调基因61个,表达下调基因252个。生物信息学分析显示针刺干预后,差异表达基因显著富集在含胶原蛋白的细胞外基质、甲状腺激素合成及代谢过程、跨膜受体蛋白酪氨酸激酶信号通路、糖胺聚糖结合、轴突导向、细胞外基质受体相互作用、细胞黏附分子、细胞因子-细胞因子受体相互作用、PI3K-Akt信号通路、TGF-β信号通路及癌症等相关通路。通过交集筛选和PPI分析得到COL1A2、CLDN16、APOE、APLNR为针刺干预气郁质的种子节点基因,其表达在针刺干预后下调并趋向于平和质。结论:1.气郁质与平和质在分子层面具有显著差异。富集分析得到的生物过程和信号通路涉及神经内分泌、神经可塑性、神经递质、胆碱能系统,主要受TGF-β信号、PI3K-Akt信号通路、c AMP信号通路的调控。APLNR、SPARCL1、CLDN16、ADAMTS15、CNTN4是气郁质的关键基因。2.针刺干预气郁质可以有效改善气郁质积分,缓解焦虑、抑郁情绪,改善睡眠质量。其作用机制可能与诱导气郁质者的神经内分泌、神经可塑性改善相关,并可能通过TGF-β信号通路和PI3K-Akt信号通路发挥调控作用。COL1A2、CLDN16、APOE、APLNR可能是针刺干预气郁质的功能基因,其表达在针刺干预后下调并趋向于平和质。