本研究从原油中分离筛选到一株高效烷烃降解菌XCZ，经形态观察、生理生化特征、16S rDNA序列分析等将其初步鉴定为铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）。XCZ能以正十八烷为唯一碳源生长，在含500mg／L正十八烷为唯一碳源的培养基中培养40h后正十八烷降解率达97．5％。XCZ降解正十八烷的最适温度为37℃，最适pH值为7．0。XCZ可以降解高浓度原油（2g/L）中C₁₃-C₃₂的直链烷烃，其中对C₁₃-C₂₄烷的降解率大于80％。从P．aeruginosa XCZ的基因组DNA中扩增到了烷烃单加氧酶基因alkB1、alkB2，与模式菌株P．aeruginosa PAO1中的alkB1、alkB2基因同源性均大于99％。为了进一步研究P．aeruginosa中alkB1、alkB2基因在烷烃降解中所起的作用，分别构建了两个用于突变P．aeruginosa XCZ中alkB1、alkB2基因的自杀式质粒：pEXB1’K用于突变alkB1基因，pJQB2’T用于突变alkB2基因。利用三亲接合的方法将两个同源重组质粒分别导入P．aeruginosa XCZ中，得到了alkB1基因单突变菌株B1M、alkB2基因单突变菌株B2M；将pJQB2’T导入B1M中得到了alkB1/alkB2基因双突变菌株B12M。Southern杂交的结果显示在P．aeruginosa XCZ中只存在单一的alkB1、alkB2基因拷贝；B1M、B12M中的alkB1基因以及B2M、B12M中的alkB2基因已经被成功的突变了。通过比较野生菌株及突变菌株在不同烷烃中的生长情况，分析了P．aeruginosaXCZ中alkB1、alkB2基因的烷烃降解范围及其降解能力。研究发现双突变茵株B12M失去了对C₁₃-C₁₆烷的降解能力，但仍然能够降解C₁₇及以上的烷烃，说明在P．aeruginosa XCZ中还存在其它的烷烃降解基因，它（们）能够降解C₁₇及以上的烷烃，而alkB1、alkB2基因对于C₁₆及以下烷烃的降解是必需的。B1M、B2M均能够利用C₁₃-C₃₀烷生长，它们在C₁₄-C₂₀烷为唯一碳源培养基中的生长速率大于B12M而小于野生菌株，但在C₂₂-C₃₂烷为唯一碳源培养基中的生长速率却与B12M及野生菌株无明显差异。这说明P．aeruginosa XCZ中的烷烃单加氧酶AlkB1、AlkB2的烷烃降解范围可能都是C₁₃-C₂₀烷，它们均不能降解C₂₂及以上的烷烃。B1M在C₁₄-C₂₀烷为唯一碳源培养基中的生长速率要快于B2M，说明对于C₁₄-C₂₀烷的降解，alkB2基因相比alkB1基因起着更大的作用。B2M对C₁₃、C₁₄烷的降解效率很低，所以C₁₃、C₁₄烷的降解主要依赖于AlkB2。