论文部分内容阅读
目的:探讨卡培他滨对食管上皮永生化细胞系SHEE和其癌化细胞系SHEEC的作用以及与胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase, TP)表达的关系,为卡培他滨在食管癌化疗中的应用提供实验资料和依据。方法:采用免疫组织(细胞)化学染色法检测SHEE、SHEEC中TP的表达,并与食管鳞癌、癌旁正常上皮组织的TP表达进行对比。收集人口服卡培他滨前、后的血清,为体外细胞药敏实验做准备,并应用高效液相色谱分析法检测血清中有效代谢物(5-Fu、5’-DFUR)的浓度。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测人口服卡培他滨后血清和5-Fu、5’-DFUR对SHEE、SHEEC细胞增殖的影响。结果:TP的检测:SHEE细胞TP表达呈阴性,SHEEC细胞TP表达呈阳性,阳性反应定位于胞浆,部分细胞核也有阳性着色;正常食管上皮组织TP蛋白表达为阴性,食管鳞癌组织中TP性表达阳,表达率为76.09%(35/46),阳性反应主要定位于细胞胞浆,细胞间质也可见TP蛋白表达。人口服卡培他滨后血清(含药血清)中有效代谢物5-Fu、5’-DFUR的浓度分别为103.75ng/ml、2278ng/ml;人口服卡培他滨前血清未检测到有效的代谢物5-Fu、5’-DFUR。含药血清和5-Fu、5’-DFUR对SHEE、SHEEC细胞增殖的影响:在一定浓度和时间范围内,含药血清、5-Fu、5’-DFUR对SHEEC,含药血清、5-Fu对SHEE,均以时间-剂量依赖的方式抑制细胞生长,作用48h时抑制率达到最大值;5’-DFUR对SHEE细胞无明显生长抑制作用;浓度10%的含药血清后对SHEE和SHEEC细胞作用48h抑制率分别为11.23%、23.63% ,有统计学差异(P<0.05);10.375ng/ml的5-Fu(与浓度10%的含药血清中5-Fu的浓度相等)对SHEE和SHEEC作用48h后细胞的抑制率分别为10.57%、9.98%,无统计学差异(P>0.05);227.8ng/ml的5’-DFUR(与浓度10%含药血清中5’-DFUR的浓度相等)对SHEE和SHEEC细胞作用48h后的抑制率分别为1.69%(P>0.05)、16.76%,有统计学差异(P<0.05);10.375ng/ml 5-Fu+227.8ng/ml 5’-DFUR(分别与浓度10%含药血清中5-Fu、5’-DFUR的浓度相等)对SHEE和SHEEC细胞作用48h后抑制率分别为9.78%、22.51%,有统计学差异(P<0.05),和浓度10%的含药血清作用48h后对SHEE和SHEEC细胞的抑制率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:正常食管上皮细胞恶性转化的过程伴随着TP表达的升高。卡培他滨对食管永生化细胞系SHEE抑制作用微弱,对其癌变细胞系SHEEC具有选择性杀伤作用。TP的表达与5-Fu的化疗效果无明显相关性。