研究背景:爱泼斯坦-巴尔病毒（Epstein-Barr virus,EBV）是疱疹病毒科γ疱疹病毒亚科成员,可感染全球90%以上的人群。EBV是传染性单核细胞增多症的病原体,也是重要的DNA肿瘤病毒,主要与人类淋巴细胞和上皮细胞性肿瘤有关,如淋巴细胞源性的Burkitt’s淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤和NK/T细胞淋巴瘤等,以及上皮细胞源性肿瘤如鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）和胃癌（gastric carcinoma,GC）等。真核翻译起始因子4E（eukaryotic translation initiation factor 4E,eIF4E）是真核细胞翻译启动复合物e IF4F的组成部分,参与真核细胞中依赖m7G帽结构的蛋白翻译,并且被视为蛋白翻译过程的限速因子。研究表明eIF4E可以翻译多种肿瘤相关蛋白,与多种人类肿瘤如胃癌、结直肠癌、乳腺癌等的发生发展密切相关,但在EBV相关胃癌中eIF4E的研究尚未见报道。目的:明确EBV相关胃癌（EBV-associated gastric carcinoma,EBVa GC）组织和EBV阳性胃癌细胞系中eIF4E的表达情况,探讨EBV对eIF4E的调控机制以及eIF4E对胃癌细胞生物学表型的影响,为进一步阐明探究eIF4E在EBVa GC发生发展中的作用和作用机制提供实验基础。方法:（1）利用在线生物信息学分析网站GEPIA（Gene Expression Profiling Interactive Analysis）和人类肿瘤基因组数据库TCGA（The cancer genome atlas）数据分析eIF4E在包括胃癌在内的多种人类肿瘤组织中的表达情况,以及eIF4E高表达组和低表达组在总体胃癌和EBVa GC患者中的生存曲线差异。（2）选取37例EBVa GC（通过EBER1原位杂交实验证明）和41例EBV阴性胃癌（EBV-negative gastric carcinoma,EBVn GC）组织切片,采用免疫组织化学染色技术检测eIF4E在组织中的表达。（3）选取EBV阳性胃癌细胞系GT38,GT39和SNU719,EBV阴性胃癌细胞系SGC7901,BGC823和AGS,采用Western Blot技术在细胞系水平检测eIF4E的表达差异。（4）m TOR通路激活剂和抑制剂分别处理EBV阳性胃癌细胞系SNU719和EBV阴性细胞系SGC7901,检测eIF4E表达水平的变化。（5）采用lipo2000转染试剂在EBV阴性和EBV阳性胃癌细胞中分别转染BART11-3p模拟物和抑制物,检测eIF4E蛋白水平表达的变化。（6）双荧光素酶报告实验验证BART11-3p与eIF4E m RNA 3’-UTR区的靶向关系。（7）在EBV阴性细胞系SGC7901和BCG823中干扰eIF4E表达,流式细胞技术分析细胞凋亡和细胞周期;transwell实验检测细胞迁移能力;CCK8实验检测细胞增殖情况。结果:（1）在线生物信息学分析显示胃癌组织中eIF4E表达水平明显高于正常胃粘膜组织,且在总体胃癌和EBVa GC患者中,eIF4E高表达组的生存情况均较差。（2）Western blot和免疫组化实验结果显示,EBVa GC组织和EBV阳性胃癌细胞系中eIF4E蛋白表达水平低于EBVn GC和EBV阴性胃癌细胞系。（3）双荧光素酶报告实验确定了EBV编码的miR-BART11-3p对eIF4E m RNA的3’-UTR区的直接靶向关系,且转染BART11-3p的模拟物或抑制物48h后,eIF4E的蛋白表达被相应地下调或上调。（4）在稳定表达EBV潜伏膜蛋白LMP2A的胃癌细胞系中,m TOR通路受到抑制,eIF4E表达水平较低,在m TOR通路被药物激活或抑制后,eIF4E的表达被相应地上调或下调。（5）eIF4E表达下调可能导致胃癌细胞凋亡增加、迁移能力下降,细胞周期发生S期阻滞以及上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）降低,并且下调细胞凋亡和EMT相关蛋白的表达,如Bcl2,Caspase3,Vimentin及β-catenin等。结论:（1）EBV阳性细胞系和EBVa GC组织中,EBV编码的miR-BART11-3p可以通过靶向eIF4E m RNA的3’-UTR区来下调eIF4E蛋白表达水平。（2）EBV潜伏膜蛋白LMP2A可以通过抑制m TOR通路从而降低eIF4E蛋白表达水平。（3）eIF4E蛋白表达降低可导致胃癌细胞凋亡增加,细胞周期S期阻滞,细胞迁移能力下降;提示EBVa GC组织中eIF4E表达下调,可能是其较少发生远处转移,预后相对较好的原因,为EBV相关胃癌的诊断和治疗提供了新思路。