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绿盲蝽(Apolygus lucorum)是我国危害棉花的盲蝽蟓优势种之一,目前主要依赖化学防治,研究绿盲蝽体内重要基因的功能,对探寻绿色安全的防治措施具有重要意义。盲蝽性信息成分主要为短碳链的醛和酯组成,前人研究报道醇氧化酶(alcohol oxidase,AOX)、乙酰基转移酶(acetyltransferase,ATF)和去饱和酶(desaturase,DES)是醛和酯类物质的合成过程中的重要酶类,但它们在绿盲蝽中的功能并不清楚,因此本文开展了这三类基因在绿盲蝽体内的功能研究。RNA注射干扰是本文基因功能研究的重要手段,我们首先研究了RNA注射干扰绿盲蝽的最佳注射体积,结果表明羽化第一天的绿盲蝽成虫的最佳注射体积为100n L。本研究采用荧光定量PCR研究了8个ATF基因,2个AOX和1个DES基因在性信息素释放高峰期和未成熟雌雄虫臭腺中的表达差异,结果表明ATF基因NAA25在3龄绿盲蝽雌虫臭腺中特异性表达的特异性高表达,因此NAA25可能与绿盲蝽性信息素合成相关。本研究采用显微注射法对绿盲蝽的ATF基因NAA25、NAA20和NAA15进行了干扰,其中干扰NAA25后,性成熟绿盲蝽雌虫体内成熟卵子数量降低了87.1%(p<0.005),干扰NAA20后,性成熟绿盲蝽雌虫体内成熟卵子数量降低了95.6%(p<0.005),干扰NAA15后,性成熟绿盲蝽雌虫体内成熟卵子数量降低了98.8%(p<0.005)。利用实时荧光定量检测了这3个基因从羽化第一天到性成熟时在全虫中的表达量,这3个基因均在羽化第一天和性成熟前一天高表达,由此我们推测这3个基因在卵巢发育中起着重要的功能。在本研究中,我们通过RACE技术获得2个N-alpha-acetyltransferase(NAA)基因的全长。其中N-alpha-acetyltransferase 25(NAA25)属于Nat B复合酶的非催化亚基,N-alpha-acetyltransferase 15(NAA15)属于Nat A复合酶的辅助亚基。其中NAA25序列全长为2898bp,ORF(open reading frame)区域为2064bp,编码687个氨基酸。NAA15序列全长为1103bp,ORF区域为759bp,编码252个氨基酸。