海藻多糖生物交联剂的制备、性质及其生物学性能研究

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目的:海藻酸是一种天然聚阴离子多糖,凭其优良的成胶性和生物学性质而成为构建水凝胶的常用材料,通常用作为酶类、蛋白质、药物及动植物细胞的固定化包埋化载体,但海藻酸钠的降解速度不可控,降解产物分子量过高,很难从体内清除,从而限制了其应用范围。本文旨在制备一种具有良好降解性和生物相容性的海藻酸钠生物交联剂,并对其性质进行研究。方法:本研究采用高碘酸钠氧化海藻酸钠糖环中的C-2和C-3位羟基为双醛基的方法,制备了不同氧化度的氧化海藻酸钠,采用MTT法评价了它们的细胞毒性,并对其体内降解性和生物相容性进行了研究;将不同氧化度的氧化海藻酸钠与水溶性壳聚糖交联反应制得多糖复合水凝胶,研究了氧化度为25%和12.5%的氧化海藻酸钠与水溶性壳聚糖交联所形成的不同交联度的水凝胶的生物降解性和生物相容性;体外培养兔角膜上皮细胞,用多糖复合水凝胶包封角膜上皮细胞于Ch膜和猪角膜基质膜上,评价该水凝胶对细胞的固定化移植作用,并对该水凝胶在兔前房内的生物降解性及生物相容性进行了研究。结果:1、高氧化度的海藻酸钠具有较强的细胞毒性,随着多糖氧化度的降低细胞毒性明显减弱;在相同醛基含量的情况下,戊二醛的细胞毒性明显高于氧化海藻酸钠。2、适度氧化的海藻酸钠不但保留了海藻酸钠良好的生物相容性,而且改善了其降解性能。3、氧化海藻酸钠与水溶性壳聚糖可以通过醛基和氨基的交联反应形成水凝胶,体内生物安全性评价结果表明,该凝胶无细胞毒性,生物相容性良好。4、被包载于Ch膜和猪角膜基质膜片上的角膜上皮细胞在膜上生长良好,说明该凝胶具有良好的细胞相容性和固定化细胞转移栽体作用。5、多糖水凝胶植入兔眼前房,表现出良好的生物相容性。结论:一定氧化度的海藻酸钠是一种低毒的生物交联剂,它与水溶性壳聚糖交联制备的水凝胶是一种低毒的、生物相容性良好的细胞包载材料,为生物医用材料,缓释药物,酶工程等领域的研究和开发提供了一种新手段。
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