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研究背景本项目组前期研究结果表明,宫内生长受限(Intrauterine growth restriction,IUGR)可对足月儿脑功能发育造成严重不良影响,但是否影响早产儿脑功能发育尚不明确。为此,本研究在国家自然科学基金(项目编号:81471087)的资助下,采用振幅整合脑电图(Amplitude integrated electroencephalogram,aEEG)对宫内生长受限早产儿脑功能进行了观察;并在此基础上研究孕鼠补充牛磺酸对生长受限胎鼠脑组织miRNA表达的影响,为产前补充牛磺酸促进生长受限胎儿脑功能发育提供一定理论依据。第一部分宫内生长受限对早产儿脑功能发育的不良影响目的:探讨宫内生长受限(intrauterine growth restriction,IUGR)对早产儿脑功能发育的影响。方法采用NicoletOne脑功能监护仪对2015年1月至2016年2月在陆军区总医院附属八一儿童医院新生儿科住院胎龄32周~36+6周的早产儿于生后72h内进行监测,每次连续监测4~6h。共收集110例,其中小于胎龄儿(small for gestational,SGA)50 例和适于胎龄儿(appropriate for gestational age,AGA)60例,比较2组早产儿脑电波形的连续性、睡眠-觉醒周期(sleep wakecycling,SWC)、爆发间期(interburst interval,IBI)、最低和最高电压等指标的差异。采用卡方检验、t检验和方差分析进行统计学处理。结果早产儿连续性脑电图及睡眠-觉醒周期的出现率均为SGA组小于AGA组,差异有统计学意义(p=0.002);爆发间期SGA组>AGA组(p=0.000),最高电压及最低电压均为SGA组<AGA组(p=0.002),差异均有统计学意义(p<0.05)。SGA组低出生体重程度如小于同胎龄第3百分位者、第3～5百分位和第5～10百分位小于胎龄儿之间差异无统计学意义(p>0.05)。SGA组中单纯低血糖组(低血糖患儿的选取标准是:小于2.2 mmol/L,且无脑病者)及正常血糖组之间aEEG差异无统计学意义(p>0.05),单纯高胆红素组(高胆红素患儿的选取标准是:血中胆红素值大于171 μmol/L、且无脑病者)及正常血胆红素组之间aEEG差异无统计学意义(p>0.05)。结论SGA患儿aEEG连续性及周期性出现率减少,爆发间期相对延长,最高及最低电压降低,一定程度上延迟或抑制了早产儿脑功能发育。第二部分:孕鼠补充牛磺酸调节生长受限胎鼠脑组织miRNA表达初步探讨目的:观察宫内生长受限胎鼠及产前补充牛磺酸后生长受限胎鼠脑组织内小RNA(miRNA)的差异表达,从基因层面进一步探讨与宫内生长受限脑损伤相关miRNA,以及产前补充牛磺酸对生长受限胎鼠脑组织相关miRNA的表达的影响。方法:选取24只健康Sprague-Dawley孕鼠,随机分为3组:对照组,FGR组,牛磺酸组,每组8只孕鼠,依据全程饥饿法制作FGR模型。通过microRNA PCR芯片检测技(包括实时荧光定量PCR法(RT-PCR)在内)筛选出FGR组及牛磺酸组胎鼠脑组织中表达差异的miRNA。结果:在FGR组和牛磺酸组中,筛选出多个差异性表达的miRNA。通过牛磺酸组与对照组比较,有18个差异性表达的miRNAs,其中有5个具有显著性的异(p<0.05):mmu-mir-714,miR-135b,let-7b,miR-325,miR-148a*。通过IUGR组与对照组比较,有35个差异性表达的miRNAs,其中12个具有显著性的差异(p<0.05):miR-223,mir-875-3p,mir-299*,miR-450a-5p,mmu-mir-714,miR-135b,mir-491,miR-302b,miR-325,miR-26b,miR-340-3p,miR-208b。通过牛磺酸组与IUGR组比较,有16个差异性表达的miRNAs,其中有3个具有显著性的差异(p<0.05):miR-223,miR-30c,mir-211。根据牛磺酸组、对照组及IUCR组miRNA基因表达水平差异的变化,发现3组中miR-223的表达水平差异比较具有统计学意义的(P<0.05):牛磺酸组>对照组>宫内生长受限组。结论:根据上述结果推测 mir-875-3p,mir-299*,miR-450a-5p,mmu-mir-714,miR-135b,mir-491,miR-302b,miR-325,miR-26b,miR-340-3p,miR-208b,miR-223可能参与宫内生长受限脑损害的过程。mmu-mir-714,miR-135b,let-7b,miR-325,miR-148a*可能参与牛磺酸改善生长受限胎儿脑损害的过程。产前补充牛磺酸可能在一定程度上促进宫内生长受限胎鼠脑组织中miR-223的表达,而宫内生长受限可能抑制miR-223的表达。