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目的:①观察激光照射足三里预处理对环磷酰胺免疫损伤的预防作用。②观察不同强度激光分别照射足三里与非经非穴点免疫调节作用的疗效差异。③观察不同强度的激光对免疫调节作用的疗效差异。④探讨激光照射的光生物效应对免疫调节作用的内在机理。
方法：①将60只新西兰白兔随机分为A、B、C、D、E、F6组,每组10只;采用环磷酰胺注射造成免疫低下病理模型。②A组造模前采用10mW的810rim激光照射足三里预防;B组造模后采用10mW的810nm激光照射足三里治疗;C组造模前、后均采用采用10mW的810nm激光照射足三里预防和治疗:D组造模后采用10mw的810nm激光照射非经非穴点治疗;E组造模后采用150mW的810nm激光照射足三里治疗;F组造模后假照射无治疗。③通过检测治疗期间WBC计数改变和治疗完全结束后T、B淋巴细胞、MDA、SOD、GRP78、脾脏指数、胸腺指数的变化进行疗效统计对比和机理探讨。
结果：
[1]白细胞结果:①、WBC计数A组、C组、E组治疗2d后恢复正常范围;B组治疗3d后恢复正常范围;D组治疗5d后恢复正常范围;F组激光假照射治疗5d后没有恢复到正常范围。除D组与F组组间无统计学差异(P＞0.05),其余组间均有统计学差异(P＞0.05)。②预防处理有无之间有统计学意义(P＜0.01);治疗有无之间有统计学意义,(P＜0.01);11个时间点之间比较有统计学意义,(P＜0.01);预防和治疗存在交互作用(P＜0.01);预防和时间存在交互作用,(P＜0.05);治疗和时间存在交互作用(P＜0.01);预防、治疗和时间之间的二阶交互作用无统计学意义。③WBC计数A、F两个组在治疗期间第1-5d在不同时间点上的WBC计数比较均有显著差异(P＜0.01),A组优于F组;A、B两个组在治疗期间,第1dWBC计数A组与B组相比有显著性差异(P＜0.01),第2d、第3dpre-RX、第5dpost-RX时间点WBC计数相比也有显著差异(P＜0.05),其余时间点上WBC计数相比没有统计学上的差异(P＞0.05);B组优于A组;A、C两个组在治疗期间,第1-4d WBC计数上A与C组相比没有统计学上的差异(P＞0.05),只在治疗期的第5天A组与C组相比有显著性差异(P＜0.01),C组优于A组。④WBC计数B、F组相比,第1-2dWBC计数上B组与F组相比没有统计学上的差异(P＞0.05),只在治疗期的第3-5dB组与F组相比有显著性差异(P＜0.01),B组优于F组;D组与F组在不同时间点上的WBC计数差别的比较没有统计学意义(P＞0.05),D组无治疗效果:B、D两个组在治疗期间,第1d、第2dpre-RX时间点WBC计数上B组和D组相比没有统计学上的差异(P＞0.05),治疗第2d post-RX时间点B组和D组相比有显著性差异(P＜0.05),治疗第3-5d相比均存在显著差异(P＜0.01),B组优于D组。⑤B、E两个组在治疗期间,WBC计数只在第1dpre-RX、第2d pre-RX时间点上B组与E组相比有显著性差异(P＜0.05),其余时间点相比没有统计学上的差异(P＞0.05)。
[2]T淋巴细胞结果:①A组、B组、C组、E组与F组相比T细胞显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。②D组与F组相比T细胞显著增多,差异具有显著性(P＜0.05)。③有无预防处理之间有统计学意义(P＜0.01);有无治疗之间有统计学意义(P＜0.01);预防和治疗存在交互作用(P＜0.01);预防和治疗之间的二阶交互作用无统计学意义。④B组与D组相比T细胞显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。⑤B组与F组相比T细胞显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。⑥D组与F组相比T细胞显著增多,差异具有显著性(P＜0.05)。⑦E组与B组相比T细胞显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。⑧E组、B组与F组相比T细胞显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。
[3]B淋巴细胞结果:①A组、B组、C组、E组与F组相比B细胞显著降低,差异具有显著性(P＜0.05)。②D组与F组相比,B细胞低,但无统计学意义。③B组与A组相比B细胞低,但无统计学意义。④C组与A组相比B细胞低,但无统计学意义。⑤C组与B组相比B细胞低,但无统计学意义。有无预防处理之间有统计学意义(P＜0.01);有无治疗之间有统计学意义(P＜0.01);预防和治疗存在交互作用(P＜0.01);预防和治疗之间的二阶交互作用无统计学意义。⑥B组与D组相比B细胞计数低,差异具有显著性(P＜0.05)。⑦B组与F组相比B细胞显著降低,差异具有显著性(P＜0.05)。⑧D组与F组相比B细胞低,但无统计学意义;⑨E组与B组相比B细胞低,但无统计学意义;⑩B组、E组与F组相比B细胞显著降低,差异具有显著性(P＜0.05)。
[4]T淋巴细胞与B淋巴细胞比值比较:①治疗组与F组相比,除D组,T/B细胞的比值回升,差异具有显著性,A组、B组、C组和E组在第5天治疗结束后的T/B细胞的比值回升正常范围。A组、B组、C组、E组与F组相比T细胞显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。D组和F组没有回复到正常范围。
[5]MDA含量、SOD活性结果:①B组、C组、D组与F组相比,SOD活性明显升高(P＜0.01),同时MDA含量明显降低(P＜0.01)。②A组与F组相比SOD活性升高明显降低(P＜0.01)、MDA含量降低但无统计学意义;③E组与F组相比SOD活性、MDA含量明显升高(P＜0.01)。④MDA含量:有无预防处理之间有统计学意义(P＜0.01);有无治疗之间有统计学意义(P＜0.01);预防和治疗存在交互作用(P＜0.05)。SOD活性:有无预防处理之间有统计学意义(P＜0.01);有无治疗之间有统计学意义(P＜0.01);预防和治疗存在交互作用(P＜0.01);预防和治疗之间的交互作用无统计学意义。⑤B组与A组相比,SOD活性明显升高(P＜0.01),同时MDA含量明显降低(P＜0.01)。⑥C组与A组相比,SOD活性明显升高(P＜0.01),同时MDA含量明显降低(P＜0.01)。⑦C组与B组相比,SOD活性明显升高(P＜0.01),同时MDA含量明显降低(P＜0.01)。⑧B组与D组相比无统计学意义;⑨B组和D组与F组相比,SOD活性明显升高(P＜0.01),同时MDA含量明显降低(P＜0.01);⑩E组与B组相比SOD活性、MDA含量明显升高(P＜0.01)。(11)B组与F组相比,SOD活性明显升高(P＜0.01),同时MDA含量明显降低(P＜0.01);(12)E组与F组相比SOD活性、MDA含量明显升高(P＜0.01)。
[6]GRP78表达结果:①A组、B组、C组、D组、E组与F组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01);②有无预防处理之间有统计学意义(P＜0.01);有无治疗之间有统计学意义(P＜0.01);预防和治疗存在交互作用(P＜0.01);预防和治疗之间二阶交互作用有统计学意义(P＜0.01);③B组与A组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01)。④C组与A组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01)。⑤C组与B组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01)。⑥A组、B组、C组、E组与D组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01)。⑦D组与F组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01)。⑧B组与D组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01);⑨B组和D组与F组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01)。⑩E组与B组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01)。(11)E组和B组与F组相比,GRP78表达升高,差异具有极显著性(P＜0.01);(12)B、C、E组明显高与A、D、F组。
[7]脾脏指数结果:①A组、B组、C组、E组与F组相比脾脏指数显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。②D组与F组相比脾脏指数显著增多,差异具有显著性(P＜0.05)。③有无预防处理之间有统计学意义,(P＜0.01);有无治疗之间有统计学意义,(P＜0.01);预防和治疗无交互作用,(P＞0.05)。
[8]腺指数结果:①有无预防处理之间有统计学意义,(P＜0.01);有无治疗之间有统计学意义,P＜0.01;预防和治疗存在交互作用,(P＜0.01)。②B组与D组的胸腺指数相比,差异具有极显著性(P＜0.01)。③B组与F组相比胸腺指数显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。④D组与F组相比,胸腺指数显著增多,差异具有显著性(P＜0.05)。⑤E组与B组相比,胸腺指数显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。⑥E组、B组与F组相比,胸腺指数显著增多,差异具有极显著性(P＜0.01)。
结论：①激光照射足三里穴预防处理能够提高机体免疫力,具有预防和减少免疫损伤的作用,起到治未病的效果;②激光照射足三里穴对机体免疫功能的协调具有调欲病和治己病的作用;③预防处理加治疗组对免疫功能低下的调节疗效最佳;④激光照射足三里穴能提高机体免疫功能,起效快,激光照射非经非穴点无免疫调节作用的疗效;⑤研究结果表明,10mW和150mW的810nm激光对免疫调节作用的疗效与以往的研究结果不一致,说明中强度激光和低强度激光在调节免疫功能可能具有同等的效果,所以其机制有待进一步研究;⑥激光穴位照射可能是通过光生物效应对GRP78的影响;也可能是通过“活性氧(ROS)-钙离子(Ca2+)一葡萄糖调节蛋白78(GRP78)轴”,在光针治疗中发挥作用,影响及调节免疫系统功能。