论文部分内容阅读
目的:肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,其中约75%的病例为非小细胞肺癌(NSCLC),另外约25%为小细胞肺癌(SCLC)。其治疗效果在近十年中没有显著的提高,有研究显示:肺癌已成为世界各国发病率及死亡率的首位。其中主要原因是肺癌是多基因、多因素的疾病,生物学特性十分复杂,且恶性程度高,早期诊断困难和治疗方法有限。
血管内皮生长因子(VEGF)作为目前发现的唯一特异性促进血管内皮细胞有丝分裂的生长因子,在血管新生过程中的作用正越来越受到重视。在肿瘤的发生、发展及转移中发挥着重要作用,并与一些重要的生理病理过程有关。近年研究显示VEGF在乳腺癌、食管癌及甲状腺滤泡癌等多种恶性肿瘤过表达。同时,关于VEGF基因多态性与肿瘤易感性的关系也有研究。但目前国内尚未见到关于VEGF基因多态性与NSCLC易感性关系的报道。
本实验拟应用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测我国北方汉族NSCLC患者及正常对照者VEGF 936 C/T和VEGF-2578 C/A的基因型。初步研究和探讨VEGF 936 C/T和VEGF-2578 C/A基因型与我国北方汉族人群NSCLC易感性的关系。
方法:非小细胞肺癌患者组中276例均来自我院呼吸内科于2005年10月至2007年12月间收治的住院患者,其中男183例,女93例,年龄16-88岁。所有病例均经组织病理或细胞病理检查确诊为非小细胞肺癌;同时选取与病例组的性别和年龄相匹配的健康对照人群279例,对每个研究个体采静脉抗凝血5ml(NSCLC组于放、化疗前抽血),同时记录其病史、个人相关资料及NSCLC患者淋巴结转移情况。以蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取外周血白细胞DNA,采用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测NSCLC患者及正常对照者VEGF936T/C和VEGF-2578 C/A的基因型。
数据统计分析采用SPSS 11.5版软件包进行,P<0.05认为有统计学意义。对照组基因型频率进行Hardy-Weinberg平衡分析。NSCLC患者组与对照组的年龄差异采用t检验。NSCLC患者组与对照组的基因型、等位基因频率分布比较采用行×列表卡方检验。连锁不平衡分析采用2LD软件。以非条件Logistic回归法计算经性别、年龄、吸烟状况校正的相对风险度的比值比(OR)及其95%可信区间。
结果:
1.研究对象的一般特征NSCLC患者组中男性183例,女性93例,年龄16-88岁,平均年龄61.15±11.89岁。健康对照组中男性191例,女88例,年龄25-97岁,平均年龄61.60±12.10岁。NSCLC患者组与健康对照组间的性别、年龄构成比均无显著差异。NSCLC肺癌患者组与对照组吸烟个体比例分别为47.5%和47.0%,相比无统计学意义。
2.VEGF 936 C/T SNP基因型分布与NSCLC的关系VEGF 936 C/T的等位基因和基因型频率分布在NSCLC患者组和健康对照组之间无统计学意义。
3.VEGF-2578C/A SNP基因型分布与NSCLC的关系VEGF-2578C/A SNP的A等位基因频率在肺癌患者组为26.3%,显著高于健康对照组的21.0%(X2=4.323)。肺癌患者组的C/C、C/A+A/A基因型频率分别为54.0%、46.0%(由于A/A基因型频率较低,将C/A与A/A基因型合并);健康对照组的C/C、C/A+A/A基因型频率分别为62.7%、37.3%。两者相比有统计学意义(X2=4.36)与C/C基因型相比,携带A等位基因(C/A或A/A基因型)显著增加NSCLC的发病风险。经性别、年龄、吸烟状况较正后的OR=434,95%CI=1.022-2.013。根据个体吸烟状况分层分析发现,与C/C基因型相比,携带A等位基因(C/A或A/A基因型)显著增加吸烟者NSCLC的发病风险,经性别、年龄、较正后的OR=1.717,95%CI=1.044-2.825。
4.VEGF 936 C/T与VEGF-2578C/A SNP基因型分布与NSCLC淋巴结转移的关系对有无淋巴结转移进行分层统计后未发现VEGF 936C/T及VEGF-2578C/A SNP基因型对NSCLC淋巴结转移有影响5 对VEGF 936 C/T与VEGF-2578C/A两个SNP位点进行连锁不平衡分析。结果发现,两多态性位点间不存在连锁不平衡(D=0.273362)。
结论:
1.VEGF 936 C/T的等位基因和基因型频率分布在NSCLC患者组和健康对照组之间无统计学意义。说明VEGF 936 C/T的SNP可能与NSCLC的发病风险无关。
2.VEGF-2578C/A SNP可能与NSCLC的发病风险相关,即携带A等位基因显著增加NSCLC的发病风险。进一步分层统计发现:携带A等位基因的吸烟个体显著增加NSCLC的发病风险。
3.VEGF 936 C/T及VEGF-2578C/A SNP基因型可能与NSCLC淋巴结转移无关。