运动预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

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目的:研究运动预处理对MCAO大鼠缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探索其神经保护的作用机制,为临床脑缺血再灌注损伤的治疗提供新的思路。实验方法:成年雄性SD大鼠(体重240±20g)90只,随机分组分为三个组,即:Sham组、MCAO模型组和运动预处理组,每组30只。造模前,运动预处理组练习4周。模型组和运动预处理组的均采用线栓法进行大脑中动脉栓塞处理。大鼠栓塞2h,拔出线栓进行血流再灌注,之后进行神经功能评价,检测神经功能损伤程度;免疫荧光染色及甲苯胺蓝(Toluidine Blue)染色法观察缺血半暗带皮层神经元的数量;Real-time PCR检测炎症相关因子的表达;Western blot检测TLR4和NF-kB蛋白表达。实验结果:Longa评分结果显示与Sham组相比,MCAO组评分明显升高(P<0.001);与MCAO组相比,Moter+MCAO组评分明显下降(P<0.05),结果具有统计学意义。Berderson评分结果显示与Sham组相比,MCAO组评分明显升高(P<0.001);与MCAO组相比,Moter+MCAO组评分明显下降(P<0.001),结果具有统计学意义。攀绳实验评分结果显示与Sham组相比,MCAO组评分明显升高(P<0.001);与MCAO组相比,Moter+MCAO组评分明显下降(P<0.001),结果具有统计学意义。网屏训练、加速转棒实验和平衡木实验也得到的相似的结果。免疫荧光、甲苯胺蓝(Toluidine Blue)的方法检测神经元的数量,与Sham组相比,MCAO组神经元数量明显下降(P<0.001);与MCAO组相比,Moter+MCAO组神经元数量明显上调(P<0.01),结果具有统计学意义,说明运动预处理能明显改善MCAO引起的大鼠皮层神经元丢失现象。运动预处理能够有效改善脑卒中后大鼠神经功能评分,减少神经细胞的丢失程度,改善神经功能损伤。利用Real-time PCR定量分析对炎症因子的表达进行检测。实验结果显示:与Sham组相比,MCAO组表达显著上升;与MCAO组相比,Moter MCAO组的表达明显下降,结果具有统计学意义。MCAO模型组,TLR 4和NF-κB蛋白的表达水平都上升;与单纯MCAO组相比,运动前处理群的TLR 4和NF-κB蛋白的表达水平明显降低。说明运动前处理,运动前处理可通过降低TLR 4的表达来减少NF-κB的转录控制,进而降低MCAO后大鼠皮质炎症因子的表达。结论:1.运动预处置能明显改善MCAO引发的大鼠神神经功能损伤。2.运动预处理可以通过TLR4/NF-κB信号转导通路有效抑制MCAO引起的炎症因子的释放,减轻神经损伤。
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