碳包铁纳米搭载多西紫杉醇的制备及抗肝癌细胞的研究

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肝癌是常见恶性肿瘤,具有高度的恶性生物学行为,临床预后差。常规化疗药物对肝细胞癌的抑制效果有限,且化疗药物细胞毒性大,特异性差,在对肝癌细胞杀伤的过程中容易造成肝脏及其它器官系统的损伤。因此目前对原发性肝癌细胞毒类化疗药物的研究主要集中在给药途径和给药方法的改进上。近年来,临床抗癌新药不断涌现,多西紫杉醇(Docetaxel, DTX)是在紫杉醇基础上合成的新型抗肿瘤药物,曾被认为是最有效的化疗单药之一,但如果沿用常规给药方法和给药途径则对肿瘤外细胞的损伤不可避免。新近分子靶向技术发展为肝癌的临床治疗带来新的机遇,纳米技术的发展及纳米材料搭载化疗药物不断在肿瘤研究中得到应用,并取得了良好治疗效果。本课题中我们对碳包铁纳米(Carbon-containing iron nanoparticles, CCINs)搭载DTX进行研究,并观察其对肝癌细胞的细胞毒作用,为探讨肝癌治疗新途径及提高DTX应用效果提供初步实验依据。第一章碳包铁纳米搭载多西紫杉醇的制备的研究研究目的探讨CCINs对DTX的搭载效果,并评价其理化性质,探讨碳包铁纳米-多西紫杉醇(CCINs-DTX)的制备工艺。研究方法采用超声乳化-溶剂挥发合成技术对CCINs进行DTX搭载,并采用比色法评价其载药量,包封率、释放效能,并考察其磁性,采用激光粒径仪器考察其稳定性。研究结果采用超声乳化-溶剂合成CCINs-DTX后检测发现其载药量为274 mg/g,包封率为82.74%,能够快速达到有效浓度,并能够维持稳定的高药物浓度,CCINs-DTX稳定性检测发现其三个月内粒径无显著变化,具有良好的稳定性,磁性检测表明其具有磁响应性。研究结论通过超声乳化-溶剂合成技术制备的CCINs-DTX制剂具有良好载药率、包封率、释放性能及稳定性,并具有良好的磁响应性。第二章CCINs-DTX对体外培养的肝癌细胞生长及凋亡的影响的研究研究目的观察CCINs-DTX对体外培养的肝癌细胞的生长及细胞凋亡的影响,探讨其抗肿瘤的机制。研究方法体外培养的肝癌细胞随机分为四组:药物组(DTX)、微粒药物组(CCINs-DTX)、空白组(NS)和空白微球组(CCINs)。药物组采用DTX干预,微粒药物组采用CCINs-DTX干预,空白组采用生理盐水干预,空白微球组采用CCINs干预。采用比色法检测各组细胞生长抑制率,采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡指数,对比各组细胞生长抑制率、凋亡指数。研究结果在<80mg/L药物浓度时,24h、48h及72h检测表明,药物组同药物微粒组细胞抑制率无显著差异;在>80mg/L药物浓度时,24h、48h及72h检测表明,药物微粒组细胞生长抑制率高于对照组;微粒组同空白组相比,未表现出细胞生长抑制;同空白组及微粒组比较,药物组及药物微粒组细胞调亡率升高;同药物组比较,药物微粒组细胞凋亡率升高;微粒组同空白组比较,细胞凋亡率无显著差异。研究结论CCINs-DTX对体外培养的肝癌细胞生长具有明显的抑制作用,其能通过促进肝癌细胞凋亡发挥对肝癌细胞的抑制作用。
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