Bcl-2和胶原Ⅰ在胆管损伤修复不同平面的表达

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目的:探讨Bcl-2和胶原Ⅰ在胆管损伤修复后不同平面表达的特点。方法:健康比格犬30只,随机分为正常对照组、胆管损伤组、高位平面损伤修复组、中位平面损伤修复组和低位平面损伤修复组。建立胆管损伤模型,术中同时行不同平面修复,术后第15天处死所有实验犬,开腹取出各组肝外胆管标本,实验观察期间随访各组实验犬一般情况及术后并发症。标本行HE染色后光镜下观察,用免疫组化MaxVision快速法检测各组胆管标本中Bcl-2和胶原Ⅰ的表达,然后用图文分析系统进行各标本的Bcl-2蛋白和胶原Ⅰ的积分光密度及成纤维细胞Bcl-2蛋白阳性细胞表达率的测量。结果:HE片光镜下观察示各损伤修复组中胆管黏膜上皮脱落,胆管瘢痕组织胶原纤维排列致密杂乱,瘢痕中新生血管增多,部分管壁增厚。免疫组化后,用图文分析系统测量提示:Bcl-2蛋白免疫组化积分光密度值:在损伤修复组的表达,越接近低位平面表达上调也越明显;中位和低位平面表达显著高于高位平面(P<0.05),而低位和中位平面之间无统计学意义(P>0.05);在损伤修复组的三个平面分别高于损伤组或对照组相对应的平面(P<0.05),在损伤组的高位或中位平面和对照组相对应的平面之间无统计学意义(P>0.05),而在低位平面,损伤组和对照组之间有统计学意义(P<0.05)。成纤维细胞Bcl-2蛋白阳性细胞表达率:在损伤修复组,越接近低位平面表达上调也越明显,中位和低位平面表达显著高于高位平面(P<0.05),而低位和中位平面之间无统计学意义(P>0.05);在损伤组的低位平面显著高于高位平面(P<0.05),而低位或高位分别和中位之间无统计学意义(P>0.05)。在损伤修复组的三个平面分别高于损伤组或对照组相对应的平面(P<0.05);在损伤组的高位或中位平面和对照组相对应的平面之间无统计学意义(P>0.05),而在低位平面,损伤组和对照组之间有统计学意义(P<0.05)。胶原Ⅰ蛋白免疫组化积分光密度值:在损伤修复组的表达,越接近低位平面表达上调也越明显;在损伤修复组的高位、中位和低位平面三者之中,每两者之间均有统计学意义(P<0.05);在损伤组的高位平面分别与低位或中位平面之间均有统计学意义(P<0.05),而低位和中位平面之间无统计学意义(P>0.05);损伤修复组的三个平面分别高于损伤组或对照组相对应的平面(P<0.05);在高位平面,损伤组和对照组之间无统计学意义(P>0.05),而在中位和低位平面,损伤组和对照组之间相对应的平面有统计学差异(P<0.05)。结论:Bcl-2蛋白、成纤维细胞Bcl-2蛋白的阳性细胞表达率和胶原Ⅰ在损伤修复的胆管中表达增高,且在不同平面的表达活跃程度也有所不同,越靠近损伤位点(低位平面),Bcl-2蛋白、成纤维细胞Bcl-2蛋白的阳性细胞表达率和胶原Ⅰ的表达越活跃,反之亦然。本实验结果提示:在背景相同的BDI环境下,BDI后行高位平面修复,Bcl-2蛋白和成纤维细胞Bcl-2蛋白阳性细胞表达率和胶原Ⅰ的表达要低于低位平面修复的BDI。由于胆管损伤修复后Bcl-2和胶原Ⅰ与修复术后胆管再狭窄直接相关。因此,选择高位胆管-空肠吻合有可能较低位胆管-空肠吻合有着更低的远期狭窄发生率。
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