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银屑病是一种以表皮角质形成细胞异常增殖、表皮及真皮内多种炎细胞浸润为特征的自身免疫性皮肤病。木犀草素是一种生物类黄酮,这种纯黄色晶体广泛存在于水果、蔬菜及草药中。其已知的药理作用包括了对角质形成细胞以及多种癌症相关细胞在内的细胞抑制增殖以及促进凋亡、抗炎、抗氧化等。木犀草素对于银屑病的治疗作用,尚未见报道。目的:通过用LPS刺激HaCaT细胞,建立银屑病样细胞模型,探讨木犀草素对于HaCaT细胞增殖、凋亡调控以及对相关炎症因子的影响。方法:1.实验采用CCK-8法,检测不同浓度木犀草素(0、1、10、25、50、100μmol/L)在不同时间(24 h、48 h、72 h)刺激后,HaCaT细胞的存活率,选择对细胞没有毒性的最大浓度。根据以上结果,制定合理的木犀草素刺激方案(10μmol/L刺激24 h)。2.采用CCK-8法,检测不同浓度脂多糖(0、0.1、1、10、20μg/m L)刺激24 h后,HaCaT细胞的存活率。同时通过western blot以及RT-PCR手段检测银屑病相关炎症因子NF-κB P65、IL-6的蛋白及m RNA表达情况,并选择适合的脂多糖刺激浓度(20μg/m L)建立银屑病细胞模型。3.利用LPS分别刺激木犀草素预处理组与对照组HaCaT细胞,通过western blot及RT-PCR手段检测NF-κB P65、IL-6的蛋白与m RNA表达情况。4.通过流式细胞技术,检测木犀草素预处理组与空白组HaCaT细胞的凋亡情况。5.通过ELISA检测木犀草素预处理组与对照组的HaCaT细胞上清液中银屑病相关炎症因子IL-17、IL-23、TNF-α的蛋白表达。结果:1.随着木犀草素刺激HaCaT细胞的浓度及时间的增加,木犀草素对细胞显示出不同程度的抑制作用,其差异具有统计学意义(P<0.05);2.LPS刺激HaCaT细胞增殖、炎症因子NF-κB P65及IL-6表达上调,且与浓度成正比,诱导细胞出现银屑病皮炎样改变;3.与对照组相比,木犀草素预处理组中炎症因子NF-κB P65、IL-6的蛋白与m RNA表达降低,且差异具有统计学意义(P<0.05);4.与空白组相比,木犀草素预处理组HaCaT细胞促进了细胞的调亡,差异具有统计学意义(P<0.05);5.与空白组相比,木犀草素预处理组对LPS诱导的HaCaT细胞银屑病相关的炎症因子IL-17、IL-23、TNF-α的释放具有抑制作用,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:木犀草素对HaCaT细胞具有毒性作用,可显著下调LPS诱导的HaCaT细胞相关炎症因子的表达,包括NF-κB P65、IL-6、TNF-α、IL-17、IL-23,并且诱导细胞凋亡。