嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染诱发的疾病给黄鳝(Monopterus albus)养殖业带来了巨大风险。巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种重要的先天免疫调节因子,在细胞增殖和免疫应答的激活等多种信号转导通路中起重要作用。CathepsinB属于木瓜蛋白酶家族中的溶酶体半胱氨酸蛋白酶,在参与细胞内蛋白质降解、维持细胞稳态的正常代谢、间接参与免疫反应等方面起重要作用。迄今未有人对黄鳝MIF和CathepsinB基因进行研究。在本实验中我们用同源克隆的方法获得,并分析了黄鳝MIF和Cathepsin B基因的开放阅读框(openreadingframe,ORF)。并用荧光定量PCR技术分析了 MIF和Cathepsin B基因在正常健康黄鳝肠、肝脏、肌肉、皮肤、脾脏、肾脏和心脏等组织中的组织表达模式。检测了嗜水气单胞菌攻毒(A.hydrophila),检测了黄鳝在攻毒后Oh、4h、8h、12h、24h和48h后MIF和CathepsinB基因在黄鳝皮肤、肝脏、肾脏、脾脏中的表达情况。MIF基因的开放阅读框长348bp,编码115个氨基酸,序列已呈递NCBI数据库(序列号为KY318074)。CathepsinB的开放阅读框长993bp,编码330个氨基酸,序列已呈递NCBI数据库(序列号为KY318075)。基因相似性分析表明,MIF与其他鱼类、两栖类、哺乳类相似性达到72%-90%,CathepsinB与其他鱼类、两栖类、鸟类、哺乳类的相似相达到80%-94%。MIF和Cathepsin B的系统发育分析表明,其进化树都主要分为两支,一支包含鱼类的蛋白质序列,另一支包含两栖类、爬行类、哺乳类和鸟类的蛋白质序列,证实了不同群体间的进化关系。MIF在所有检测的组织中都表达,在肝脏和肾脏表达量最高,在心脏、脾、肠和肌肉的表达水平次之,在皮肤中表达水平最低。CathepsinB在肝、脾、肾的表达量高于在肠道、肌肉、心脏和皮肤中的表达量。经嗜水气单胞菌攻毒后Oh到48 h,MIF和Cathepsin B基因的表达量在皮肤、肝脏、头肾、脾脏表达量都升高,12h达峰值,并且这种诱导是时间依赖性的。说明MIF和Cathepsin B参与了黄鳝对抗嗜水气单胞菌感染的免疫应答。结果表明MIF和Cathepsin B在组织表达量的增加,可能是由于其参与了黄鳝对抗败血症的免疫应答。