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背景:树突状细胞（dendritic cell,DC）是目前公认的抗原提呈功能最强的细胞。结节性硬化症复合体1（tuberous sclerosis complex 1,Tsc1）是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1（mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1）的上游关键性抑制因子,对细胞生长发育起着重要的调控作用。我们课题组前期研究表明,Tsc1在DC发育和激活中具有重要作用,并且Tsc1可通过抑制mTORC1促进T细胞稳态和应答;然而,Tsc1在转录水平对DC稳态和抗原提呈功能相关基因的调控的分子机制仍未阐明。目的:本研究通过比较特异性敲除Tsc1基因的小鼠DC与CD11c-Cre重组酶阴性对照的小鼠DC的转录谱,探究Tsc1在转录水平调控DC稳态和抗原提呈功能的分子机制。方法:（1）利用Cre-LoxP重组酶系统,通过将体内Tsc1两端均带有loxP序列的Tsc1f/f转基因小鼠和在溶菌酶启动子调控下表达CD11c-cre重组酶的CD11cCre转基因小鼠（即亲代小鼠）杂交,建立CD11c-Cre重组酶阴性即未敲除DC中Tsc1且体内Tsc1两端均带有LoxP序列的纯合子对照组小鼠(Tsc1f/f小鼠)和CD11c-Cre重组酶阳性即敲除DC中Tsc1且体内Tsc1两端均带有LoxP序列的纯合子小鼠(CD11cCreTsc1f/f小鼠),然后采用PCR和Western blot分别在基因水平与蛋白水平鉴定小鼠DC中Tsc1敲除情况;（2）Tsc1f/f小鼠和CD11cCreTsc1f/f小鼠脾脏细胞先后经CD11c磁珠分选及流式分选仪分选后获得高纯度DC;（3）设立3组实验组,即Tsc1f/f对照组、CD11cCreTsc1f/f组和体外将CD11cCreTsc1f/f小鼠脾脏DC经雷帕霉素（rapamycin,RAPA）处理组（RAPA是mTORC1特异性抑制剂,经RAPA处理以抑制mTORC1后观察mTORC1改变对Tsc1对DC调控的影响）;（4）应用流式细胞术检测各组DC线粒体膜电位和膜通道孔活性、凋亡率、Ki67增殖抗原表达水平以及通过Eα多肽刺激后MHC II类复合物表达水平测定DC抗原提呈能力;（5）采用基因芯片检测3组实验组DC的全转录组基因表达,分析差异基因,经京都基因与基因组百科全书数据库（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）和基因集富集分析（gene-set enrichment analysis,GSEA）探究DC中信号通路富集分析;（6）经实时荧光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR）验证差异基因的表达水平。结果:（1）成功建立了特异性敲除DC中Tsc1的基因敲除小鼠(CD11cCreTsc1f/f小鼠),并且在基因水平以及蛋白水平验证DC中Tsc1被特异性敲除。（2）相对于Tsc1f/f对照组,CD11cCreTsc1f/f组DC的凋亡率、线粒体膜电位和通透性和Ki67增殖抗原表达水平均明显增加;经RAPA处理后,DC的凋亡率和增殖抗原Ki67表达水平均降低。而且Eα多肽刺激后,CD11cCreTsc1f/f组DC的MHC II类复合物表达水平,即DC抗原提呈能力明显强于Tsc1f/f对照组DC,并且可被RAPA所抑制。（3）KEGG和GSEA分析显示DC中的Tsc1对许多调控代谢的基因表达具有显著影响,这些代谢过程包括糖酵解、氧化磷酸化、脂肪酸代谢、蛋白质代谢、氨基酸代谢、tRNA转运、氨基酸转运、蛋白转运、吞噬作用和内吞作用等。（4）基因芯片检测结果显示,相对于Tsc1f/f小鼠,CD11cCreTsc1f/f组小鼠DC在调控DC存活、增殖、代谢、物质转运以及抗原提呈等方面的相关基因表达水平均增加,这些基因包括Bub1b、Mad2l1、Ccnb2、Ccnb1、Casp6、Casp8、Prkaca、Cox6a2、Hk3、Ndufs8、Tpi1、Man1c1、Hpse、Nfe2l2、Renbp、Hexa、Lpin1、Acot2、Hexb、Xbp1、Nup35、Aaas、Sec61g、Nrp1、Lgmn、Cd4、Ctsb与Ctsl等;而且,CD11cCreTsc1f/f小鼠脾脏DC体外经RAPA作用、抑制mTORC1后,上述基因的改变幅度明显减弱;RT-qPCR确认了基因芯片的检测结果。结论:Tsc1可以从转录水平调控与DC存活、增殖、代谢、物质转运以及抗原提呈相关的基因表达,从而影响DC的稳态和抗原提呈功能;而且上述效应受mTORC1活性的影响。