达托霉素是继万古霉素之后上市的新一代环脂肽类抗生素。近年来,我国达托霉素市场发展迅速,其生产备受国家和业界重视。2015年11月份,杭州华东医药股份有限公司成为国内首家拿到CFDA注册批文的制药企业。目前,公司达托霉素生产中遇到发酵水平不高、收率低、成本高等问题。因此,通过对达托霉素的发酵工艺进行研究,以提高达托霉素发酵水平,降低生产成本是当前工业化发酵生产达托霉素的首要目标。本研究主要进行了以下工作:首先对玫瑰孢链霉菌(Sterptomyces roseosporus SY09)摇瓶发酵生产达托霉素的工艺进行了优化,当种龄为28 h,接种量为12%,发酵培养基初始为pH 8.0,250 ml摇瓶中装液量为30 ml时,30℃、200rpm条件下培养时间144 h,达托霉素产量达到235 mg/l。进一步对培养基成分进行了优化,最佳发酵培养基配方为(w/v):葡萄糖2.0%,糖蜜2.0%,玉米淀粉3%,蛋白胨2%,尿素0.6%,硫酸亚铁铵0.08%,初始pH值均为8.0,优化后达托霉素产量达296mg/l。其次,对1 m~3发酵罐生产达托霉素发酵过程进行了详细考察,结果表明,最佳接种量为6%,最适pH为7.1,溶氧不低于30%。确定罐上发酵最佳配方为(w/v):葡萄糖2.5%,糖蜜2.0%,玉米淀粉3%,蛋白胨1.5%,尿素0.6%,硫酸亚铁铵0.08%,初始pH值均为8.0。在葡萄糖实验考察基础上,最终确定了一个较好的葡萄糖补料方案,在20 g/100 ml葡萄糖补加模式下发酵180 h后,达托霉素产量达到2388 mg/l。最后通过15 m~3发酵罐上实验考察了前体补加对达托霉素发酵的影响,结果表明,癸酸与油酸甲酯1:1混合物是最适前体组成,并确定了最佳补料速度及补入时间点。在优化的工艺条件下,发酵终点时达托霉素效价达到3182 mg/l。