己酮可可碱对蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的保护作用及其机制的研究

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背景:蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage,SAH)主要是由于颅内动脉瘤破裂导致,尽管只占脑卒中的5%,但具有较高的致残率和致死率。过去一直认为SAH后3~7天迟发性血管痉挛是导致SAH患者不良预后的主要原因,但是现在研究发现,即使有效的阻止迟发性血管痉挛,仍然不能改善患者的预后。目前研究表明SAH后早期脑损伤(Early brain injury,EBI)是导致高致残率和致死率的主要原因。EBI是指发生在SAH后72小时内的脑损伤,其发生的病理生理机制非常复杂,早期包括:颅内压(Intracranial pressure,ICP)急剧升高、脑血流量(Cerebral blood flow,CBF)急剧减少、脑灌注压(Cerebral perfusion pressure,CPP)下降和外周血压升高。这些因素的改变又会导致炎性反应、氧化应激、血脑屏障(Blood brain barrier,BBB)破坏及神经细胞凋亡等一系列的二次损伤。己酮可可碱(Pentoxifylline,PTX)是一种非特异性选择性磷酸二酯酶抑制剂,与咖啡因、可可碱和茶碱的特性类似,能阻断环磷酸腺苷(Cyclic adenosine monophosphate,c AMP)转变为磷酸腺苷(Adenosine monophosphate,AMP),使细胞内c AMP增加,具有改善外周血管血流动力学、较强的抗炎、抗氧化及免疫抑制作用等。方法:(1)我们采用视交叉前池一次注自体血法制成SAH后EBI模型,在蛛网膜下腔出血30分钟腹腔注射PTX,分别于24小时、72小时后根据Yamaguchi评分系统对大鼠进行神经功能评分。处死大鼠,取大脑组织做标本,应用干湿重比值法测定大脑含水量,探讨PTX对大鼠SAH后EBI是否具有神经保护作用。(2)采用视交叉前池一次注自体血法制成SAH后EBI模型,在蛛网膜下腔出血30分钟腹腔注射PTX,24小时后取颞叶皮层脑组织做标本,Western blot法测定TLR4、核蛋白p65,浆蛋白p65、My D88、ZO-1、Bcl2及 cleaved-casepase3表达情况;应用ELISA方法分析大鼠颞叶皮层炎性因子IL-1β和TNF-α表达情况;Tunel和尼氏染色法检查神经细胞的凋亡情况;EMSA法检测NF-κB活性。结果:我们研究发现SAH后24小时和72小时大鼠脑水肿明显增加,神经功能缺陷评分明显上升,给与腹腔注射PTX(60mg/kg)后,能够显著降低SAH后24小时和72小时神经功能缺陷评分和改善脑水肿;PTX能够减少SAH后24小时大鼠颞叶皮层TLR4、My D88、核蛋白p65、cleaved-casepase3蛋白表达及IL-1β和TNF-α含量,增加ZO-1、Bcl2蛋白表达。PTX能减弱NF-κB活性并且减少神经细胞的凋亡。结论:SAH后PTX能够改善大鼠神经功能损伤和脑水肿,减轻炎性反应,减轻BBB破坏,减少神经细胞凋亡,其可能的机制是通过抑制TLR4/NF-κB信号通路来改善SAH后EBI。
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