新型交联透明质酸颗粒的制备及其性能研究

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透明质酸是广泛存在于生物体中的一种天然保湿因子,1g透明质酸至少持水600g,透明质酸是由双糖单位D-葡萄糖醛酸与N-乙酰葡糖胺多次重复排列所组成的酸性大分子多糖,具有独特的理化性质和生物学功能,广泛地应用于化妆品、食品和医药领域。但透明质酸在人体内易降解,限制了其在需要存留时间较长的领域的应用。本研究致力于得到抗酶解性好且易于注射、使用方便的透明质酸凝胶颗粒。本研究将透明质酸钠粉末与聚乙二醇20000(Polyethylene glycol,PEG)、聚乙二醇环氧醚(Poly diglycidyl ether, PDE)、1,4一丁二醇二环氧醚(1,4-Butanediol diglycidyl ether,BDDE)生成交联凝胶,经过反复醇沉去除交联剂、干燥、粉碎、药筛分级并对最佳的醇沉条件、干燥最佳温度、时间进行优化,制得分布范围较小的粒径均匀的颗粒。精密称取一定质量的颗粒并加入适量的PBS溶液经121℃高压蒸汽灭菌复溶,生成无菌的颗粒化的凝胶,对其粒径分布进行检测,并对交联透明质酸颗粒的性能诸如交联剂残留量、抗酶解性进行测定。用无水乙醇沉淀凝胶颗粒,离心取上清液检测其聚乙二醇残留量。依据聚乙二醇与钡离子和碘离子形成1:1的复合物的光密度与聚乙二醇的含量在535nm处呈线性关系的原理,制作标准曲线并建立回归方程,通过凝胶中聚乙二醇的残留量的实际检测对该方法检测结果的精确度(n=9)、加标回收率、可重复性进行检验,进一步通过残留量的实际检测来确定凝胶的交联度。最后研究了透明质酸分子量的大小以及粒径、交联剂、盐酸利多卡因的加入量和加入时间对交联凝胶颗粒的抗酶解性的影响。本研究得到的制备工艺最佳的醇沉条件为95%的乙醇与交联透明质酸钠凝胶的体积比为6.5:1~9:1,最佳的干燥温度为45℃~60℃。所得的颗粒化的交联透明质酸钠凝胶体外抗酶解性较好,且在显微镜下观察到了均匀细小的颗粒,其粒径最大值为400μm;另外本研究还建立了一种操作简单、快速、稳定性好的交联透明质酸钠凝胶中微量PEG残留量的检测方法。该检测方法在0-40.5μg/mL范围内具有良好的线性关系,所得的回归方程为Y=0.0108X+0.2047(R2=0.9994),检测的标准偏差为1.10%(n=9),加标回收率为97.8%,可重复性强;所制得的交联凝胶颗粒的抗酶解性随透明质酸分子量的增大而增大,BDDE-HA>PDE-HA>PEG-HA,而粒径在本方法对抗酶解性的影响较小,盐酸利多卡因的添加对抗酶解性的影响随着添加量的增加而增加,添加时间在制胶时和复溶后优于复溶前。本研究建立一种工艺简单、操作方便、耗时短的透明质酸凝胶颗粒的制备工艺,得到了能顺利通过美容注射针且抗酶解性较好的颗粒化凝胶。建立的PEG残留量的检测方法可用于凝胶产品的质量控制,对PEG交联的其它凝胶及含有PEG的其它液态样品中PEG残留量的检测有重要意义,对凝胶制品生产过程中其它交联剂的微量检测和产品质量控制也具有一定的参考价值。
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