目的：　　体外培养人多囊卵巢综合征子宫内膜细胞，研究补肾调冲方对多囊卵巢综合征患者子宫内膜的保护作用。　　方法：　　1.人子宫内膜细胞培养：通过诊刮获取多囊卵巢综合征患者的子宫内膜组织，采用胶原酶消化法，体外混合培养子宫内膜细胞，并对其进行传代培养；　　2.细胞鉴定：经免疫荧光法鉴定子宫内膜间质细胞及腺上皮细胞特异性表面蛋白，以证实所获得细胞为子宫内膜细胞，可进行后续研究；　　3. MTT实验：应用 MTT比色法检测子宫内膜细胞体外生长曲线，从而确定实施药物干预的时间点；检测补肾调冲方、孕酮、17β-雌二醇对子宫内膜细胞的生长抑制率，参考细胞生长抑制率IR≤10％所对应药物浓度加药干预；将子宫内膜细胞分为实验组、阳性对照组、阴性对照组、空白对照组，其中实验组、阳性对照组、阴性对照组分别予以补肾调冲方、孕酮及17β-雌二醇干预，空白对照组无干预措施；　　4.透射电镜观察子宫内膜细胞超微结构：药物干预后，分别收集各组子宫内膜细胞，对其进行固定、切片，在透射电镜下观察各组细胞的超微结构；　　5. ELISA法检测子宫内膜细胞中孕激素受体的表达：药物干预后，分别收集各组子宫内膜细胞，通过反复冻融使其释放孕激素受体，应用双抗体夹心ELISA法测定各组细胞中孕激素受体水平；　　6.RT-PCR及Western blot检测TGF-β1、Smad4 mRNA及蛋白的表达：药物干预后，分别收集各组子宫内膜细胞，采用半定量RT-PCR检测各组细胞中TGF-β1、Smad4 mRNA的表达；通过Western blot法检测各组细胞中TGF-β1、Smad4蛋白的表达。　　结果：　　1.体外成功培养出原代人子宫内膜细胞并对其进行传代培养；　　2.经免疫荧光法鉴定子宫内膜间质细胞特异性表面蛋白 Vimentin表达阳性，腺上皮细胞特异性表面蛋白 CK-19表达阳性；　　3.子宫内膜细胞体外培养第3天进入对数生长期，并持续至第5天，第6天进入平台期，因此本实验选择体外培养第3天对子宫内膜细胞实施药物干预；对子宫内膜细胞实施药物干预的浓度分别为：补肾调冲方2mg/mL，孕酮1×10-6M，17β-雌二醇5×10-7M；　　4.经透射电镜观察发现，与雌激素组、空白对照组相比，实验组、孕激素组细胞表面微绒毛数量多，有分支，甚至肿胀，线粒体体积增大，粗面内质网扩张，高尔基体肿胀；　　5. ELISA法检测子宫内膜细胞中孕激素受体水平发现，实验组子宫内膜细胞中孕激素受体浓度低于空白对照组、雌激素组，差异有统计学意义（P<0.05）；实验组孕激素受体表达与孕激素组相当，差异无统计学意义（P>0.05）；　　6.经半定量RT-PCR及Western blot检测发现，实验组TGF-β1、Smad4 mRNA及蛋白表达高于雌激素组、空白对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；实验组TGF-β1、Smad4 mRNA及蛋白表达与孕激素组相当，差异无统计学意义（P>0.05）。　　结论：　　本课题以阴阳消长理论及“肾-天癸-冲任-胞宫”轴理论为基础，通过观察体外培养的PCOS患者子宫内膜细胞形态学改变，以及子宫内膜由增生期向分泌期转变过程中标志物的变化，证实补肾调冲方能够促进子宫内膜细胞由增生期向分泌期转变，从而发挥对PCOS患者子宫内膜的保护作用。