山羊传染性胸膜肺炎病原的分离鉴定

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本研究从四川地区某羊场具有传染性胸膜肺炎临床症状的患病山羊的肺脏、气管等材料中成功地分离和鉴定了两株霉形体(分别命名为Y1和Y2)。主要通过病原分离培养特性、形态学观察、生化试验、间接血凝试验、生长抑制试验和代谢抑制试验、动物回归试验等方法进行鉴定。 鉴定结果如下:分离株Y1和Y2都能通过0.45μm的微孔滤器,进行过滤传代培养。在形态学观察中,都具有革兰氏染色不易着色,瑞氏染色良好呈淡紫色;在透射电镜下观察,Y1和Y2的菌体呈球状、丝状、杆状、螺旋状等不规则形态,大小为0.2~0.4μm。在含1%营养琼脂的固体培养基上均形成圆形、露滴状的小菌落;在40倍和100倍光学显微镜下观察时,可看见典型的煎蛋样菌落,但其形态不完全相同。Y1的菌落形态较小,菌落生长比较密集,融合菌落较多,中心脐向上突起;Y2的菌落形态较大,菌落较分散,无中心脐。在生化试验中,Y1和Y2均能够发酵葡萄糖、还原美蓝、液化血清;均不水解尿素、不水解精氨酸、膜斑形成试验呈阴性、磷酸酯酶活性呈阴性。在间接血凝试验中,提纯的Y1和Y2抗原均能与PG3和Y98标准阳性血清发生凝集反应,均不与PG3和Y98的标准阴性血清发生凝集反应。在生长抑制试验中,PG3和Y98标准阳性血清均能抑制Y1和Y2生长,并形成大于2mm的抑制圈;PG3和Y98的标准阴性血清均不能抑制Y1和Y2生长,不形成明显的抑制圈。在代谢抑制试验中,加入的标准阳性血清浓度较高时(如1:23、1:24),均能抑制Y1和Y2的生长;当加入的标准阳性血清浓度适中时(如1:25、1:26、1:27),PG3的标准阳性血清能在一定程度上抑制Y1的生长,Y98的标准阳性血清能在一定程度上抑制Y2的生长;当加入的标准阳性血清浓度较低时(如1:28、1:29),均不抑制Y1和Y2的生长。在动物回归试验中,均能成功复制出山羊传染性胸膜肺炎的典型临床症状和病理解剖变化。 试验表明,Y1和Y2的形态与培养特性、生化反应特性和血清学特性分别与模式株丝状霉形体山羊亚种PG3和绵羊肺炎霉形体Y98相接近;结果证实Y1和Y2分别为丝状霉形体山羊亚种和绵羊肺炎霉形体。
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