甘草组织快繁技术及次生代谢产物的研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:hongyan1230
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甘草作为大宗药材和经济作物,与人们的生活紧密相关,但是随着市场需求的增加,对于野生甘草资源的采挖严重,造成甘草种质资源受到严重破坏。若采用人工栽培,种子生长周期较长,繁育缓慢,制约了甘草产业的发展。因此,利用组织培养技术进行甘草的快繁,有利于甘草繁殖速度的提高,有效成分的直接提取,种质资源的保存及良种的选育。本实验通过正交实验设计,研究了不同激素组合对甘草不同外植体愈伤组织诱导率及生长情况的影响,不同激素浓度组合对甘草不同外植体愈伤组织中有效成分含量的影响及对甘草茎段扦插快繁的影响,以期确定最佳的激素组合,为甘草快速繁殖技术的应用提供理论和技术依据。其实验研究结果如下:1.该文研究了不同激素浓度对甘草外植体愈伤组织诱导的影响,在不同激素浓度的配比条件下,通过正交实验设计,采用组织培养的方法分别比较不同激素浓度对甘草下胚轴、子叶、胚根和茎愈伤组织的诱导和生长情况的影响。结果表明适宜甘草下胚轴愈伤组织诱导的培养基是6-BA1.5mg.L-1+2,4-D0.5mg.L-1+KT0.5mg.L-1+NAA0.2mg.L-1;适宜甘草子叶愈伤组织诱导的培养基是6-BA0.5mg.L-1+2,4-D0.5mg.L-1+KT0.5mg.L-1+NAA0.4mg.L-1;适宜甘草胚根愈伤组织诱导的培养基是6-BA1.5mg.L-1+2,4-D0.5mg.L-1+KT1.0mg.L-1+NAA0.2mg.L-1;适宜甘草茎愈伤组织诱导的培养基是6-BA0.5mg.L-1+2,4-D0.5mg.L-1+KT1.5mg.L-1+NAA0.4mg.L-1,以上说明不同激素浓度组合是影响甘草不同外植体愈伤组织的诱导的重要因素。2.该文研究了不同激素浓度对甘草不同外植体愈伤组织中有效成分含量的影响,在不同激素浓度的配比条件下,采用组织培养的方法分别比较不同激素浓度对甘草下胚轴、子叶、胚根和茎愈伤组织中次生代谢产物的影响。结果表明,适宜以甘草下胚轴为外植体时诱导出的愈伤组织中甘草酸和总黄酮形成的培养基是6-BA1.5mg.L-1+2,4-D0.5mg.L-1+KT1.5mg.L-1+NAA0.4mg.L-1,甘草酸产量平均最高为27.6638mg/g,黄酮产量平均最高为2.2586mg/g;适宜以子叶为外植体时诱导出的愈伤组织中甘草酸形成的培养基是6-BA0.5mg.L-1+2,4-D1.0mg.L-1+KT1.0mg.L-1+NAA0.4mg.L-1,甘草酸产量平均最高为24.6521mg/g,适宜以子叶为外植体时诱导出的愈伤组织中甘草黄酮形成的培养基是6-BA1.5mg.L-1+2,4-D0.5mg.L-1+KT1.5mg.L-1+NAA0.4mg.L-1,甘草黄酮产量平均最高为2.1277mg/g;适宜以胚根为外植体时诱导出的愈伤组织中甘草酸形成的培养基是6-BA1.5mg.L-1+2,4-D1.5mg.L-1+KT1.0mg.L-1+NAA0.2mg.L-1,甘草酸产量平均最高为21.0844mg/g,适宜以胚根为外植体时诱导出的愈伤组织中甘草黄酮形成的培养基是6-BA1.0mg.L-1+2,4-D1.0mg.L-1+KT1.5mg.L-1+NAA0.2mg.L-1,甘草黄酮产量平均最高为0.8791mg/g;适宜以茎为外植体时诱导出的愈伤组织中甘草酸形成的培养基是6-BA1.5mg.L-1+2,4-D0.5mg.L-1+KT1.5mg.L-1+NAA0.4mg.L-1,甘草酸产量平均最高为16.5345mg/g,适宜以茎为外植体时诱导出的愈伤组织中甘草黄酮形成的培养基是6-BA1.5mg.L-1+2,4-D1.5mg.L-1+KT1.0mg.L-1+NAA0.2mg.L-1,甘草黄酮产量平均最高为1.1126mg/g。因此,不同的激素浓度组合是影响甘草不同外植体次生代谢产物能力的重要因素。3.以甘草的试管苗作为研究对象,采用正交实验设计,研究不同激素浓度对甘草试管苗生长状况的影响,为甘草快繁技术提供理论基础。研究结果表明:适宜甘草试管苗生根的培养基是NAA0.2mg.L-1+IBA0.2mg.L-1+KH2PO413.5mg.L-1和IAA0.5mg.L-1+IBA0.5mg.L-1+KH2PO413.5mg.L-1;适宜甘草试管苗生长的培养基是NAA0.2mg.L-1+IBA0.4mg.L-1+KH2PO413.5mg.L-1和IAA1.0mg.L-1+IBA1.0mg.L-1+KH2PO413.5mg.L-1,因此,当KH2PO4为13.5mg.L-1时对甘草试管苗的生根及生长具有显著影响。
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