禽流感是由甲型流感病毒引起的一种禽鸟传染病。甲型流感病毒的16个主要亚型中,只有H5和H7亚型中的毒株可引起高致病性禽流感,在易感禽类物种中具有高度接触传染性,并迅速造成死亡。自1959年以来,H5、H7和H9亚型病毒已10次跨越物种障碍感染人类。H5N1已在1997年、2003年的持续暴发中造成严重疾病及高病死率。2003年至2008年4月17日,WHO报道经实验室确证的H5N1禽流感感染者共381例,死亡240例,死亡率超过60%。血凝素蛋白5(hemagglutinin 5, H5蛋白)是病毒H5N1表面的膜蛋白,与受体结合并促进病毒入胞,能诱发机体免疫系统产生中和抗体的主要抗原蛋白。但由于H5蛋白存在大量的翻译后修饰位点,主要是糖基化位点,致使通过原核细胞表达或酵母表达的蛋白将不能正确地修饰,折叠和加工处理,从而保持蛋白的活性。只有在哺乳动物细胞系统中进行表达,H5蛋白才能进行正确地修饰,折叠和加工处理,从而保持蛋白的活性。但在哺乳动物细胞系统中表达的H5蛋白又存在表达量低的特点,难以在实际中应用。因此,本论文通过一系列的优化与实验,将全长的H5蛋白及其去掉跨膜端的H5分泌蛋白在哺乳动物细胞系统中进行了高量表达及纯化。本论文通过实现H5蛋白在哺乳动物细胞系统中高量表达及纯化,使H5蛋白的大规模生产成为可能,从而为H5N1基因工程重组疫苗的规模化生产和应用提供可能。