华佗豆药材质量标准及碱甲工艺和质量研究

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华佗豆为旋花科植物丁香茄Calonyction muri-catum(Linn.)G.Don.的种子,始载于《救荒本草》,又名天茄子、跌打豆、金钱吊葫芦,此药材以干燥的种子入药。近代研究表明。华佗豆中含有生物碱成分,有明显的镇痛作用,华佗豆很有大的发展利用空间。本课题对华佗豆中生物碱成分进行了提取与纯化工艺的研究,并采用一测多评法来测定华佗豆4种生物碱的含量,除此之外,对华佗豆生物碱进行定性与定量研究,以期建立华佗豆生物碱的质量控制方法。目的:华佗豆中含有四种生物碱成分,华佗豆碱甲、乙、丙、丁,其中碱甲的止痛作用突出。为此,本课题对华佗豆进行提取,并对华佗豆中碱甲的提取与纯化方法进行了研究,并建立其质量控制方法,以期为进一步研究华佗豆提供理论基础和依据。方法:本实验采取回流提取法对华佗豆的生物碱进行提取,运用单因素考察的基础上采用正交试验确定最佳的提取工艺,并对萃取条件和多种树脂纯化进行考察,确定大孔吸附树脂对其成分进行纯化,运用不同梯度的乙醇洗脱,除杂后得到碱甲粗品,确定华佗豆生物碱的纯化工艺。采用应用高效液相法对华佗豆中生物碱进行含量测定,并采用一测多评法来测定华佗豆4种生物碱的含量。色谱柱为迪马公司(Diamonsil Plus C18,4.6×250mm,5μm);柱温:30℃,流动相=甲醇:水相(2.82g磷酸氢二钠加适量水溶解后,加入1.6mL25%四丁基氢氧化铵和0.1%磷酸,调至780mL)=50:50;流速:1mL/min;检测波长:234nm;进样量:10μL。结果:成功通过提取、分离、纯化,从而从华佗豆中制备碱甲,并进一步确定了其制备工艺。结论:通过试验成功确定了华佗豆中碱甲的制备工艺,并对其进行了分离纯化及鉴定,得到了含量大于90%的单体。
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