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研究背景和内容：胃癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,早期诊断早期治疗比较困难,晚期治疗预后不良。但胃癌的发生是个漫长的过程,从炎症--异型增生--癌变一般需要10-20年。在癌变前的阶段进行预防和治疗,能延缓异型增生的进程,减少肿瘤的发生。中医药在治疗胃癌前病变(PLGC)上具有优势和特色。猫人参是猕猴桃科植物,功效为清热解毒,祛风除湿消肿,临床主要用于麻风、消化系统肿瘤等的治疗。课题组经临床实践发现猫人参能改善PLGC的病理状态,结合文献研究发现猫人参主要的活性成分能抑制肿瘤细胞的生长。本研究主要通过猫人参醇提取物作用于PLGC大鼠的实验,来探讨猫人参醇提取物治疗P LGC的疗效和机制。全文分为两个部分,第一部分文献研究主要总结了中西医学对PLGC的病因病机、治疗、实验等方面的研究成果及现阶段对猫人参的认识。第二部分实验研究建立了PLGC大鼠模型,研究猫人参醇提取物治疗和延缓PLGC,阻断胃癌发生发展的分子作用机制。研究目的：研究猫人参醇提取物对PLGC大鼠胃黏膜病理变化、细胞增殖和细胞凋亡相关因子以及mTOR信号通路的影响.研究方法：100只5周龄左右SD雄性大鼠,适应性喂养1周后,随机分为空白组10只,造模组90只。空白组给予正常饮食,造模组给予100ug/m1MNNG自由饮用,0.03%雷尼替丁的标准鼠料,造模开始1-6周每周1次10%氯化钠溶液1ml灌胃。结合前期实验的经验,从造模22周起每周处死2只大鼠取胃组织观察病理形态学变化,确认是否造模成功。24周造模成功后,将存活的84只PLGC大鼠随机分为4组,猫人参醇提取物常规剂量组(0.03g/kg/d醇提取物灌胃)、高剂量组(0.06g/kg/d猫人参醇提取物灌胃)、维甲酸组(0.04g/kg/d灌胃)、模型组。模型组和空白组给予等剂量生理盐水灌胃。治疗持续16周后处死所有大鼠,通过HE染色、免疫组化western blot技术检测大鼠胃黏膜病理变化、Bcl-2、Bax、 Caspase-3、CyclinD1基因的表达以及mTOR信号转导通路上相关蛋白的表达。研究结果：1.空白组10只大鼠,1只死于灌胃不当,3只正常,6只慢性浅表性胃炎(CSG),无肠上皮化生(IM)和异型增生(Dys)。模型组21只大鼠,1只死于灌胃不当,2只死于胃癌,CSG 8只,CAG 5只,IM 6只,Dys 9只以IM和Dys算PLGC发生率为15只(83.3%)。猫人参醇提取物常规剂量组21只大鼠,1只死于灌胃不当,1只死于不明原因,CSG 11只,CAG 2只,IM 3只,Dys 4只,PLGC 7只(36.8%)。猫人参醇提取物高剂量组21只大鼠,2只死于灌胃不当,CSG 12只,CAG 2只,IM 3只,Dys 2只,PLGC 5只(26.3%)。维甲酸组21只大鼠,2只死于不明原因,CSG 8只,CAG 4只,IM 4只,Dys 3只,PLGC7只(36.8%)。模型组和空白组比较,PLGC发生率明显升高(P<0.01),和治疗组相比也有显著差异(P<0.05)。各治疗组之间比较PLGC发生率无显著差异(P>0.05)。2. Bcl-2、Bax、Caspase-3、CyclinD1蛋白阳性反应成棕黄色。经过MNNG造模的大鼠Bcl-2、CyclinD1表达增加。和空白组相比,模型组表达最为明显(P<0.01),猫人参醇提取物和维甲酸对Bcl-2、CyclinD1表达表现出一定的调节作用。和模型组相比,猫人参醇提取物和维甲酸能降低Bcl-2、CyclinD1的表达(P<0.01)。但猫人参醇提取物常规剂量组、高剂量组和维甲酸组之间无明显差异(P>0.05)。经过MNNG造模的大鼠Bax、Caspase-3表达降低。和空白组相比,模型组表达下降最为明显(P<0.01),猫人参醇提取物和维甲酸对Bax、Caspase-3有一定的调节作用。和模型组相比,猫人参醇提取物和维甲酸能增加Bax、Caspase-3的表达(P<0.01)。但猫人参醇提取物常规剂量组、高剂量组和维甲酸组之间无明显差异(P>0.05)。3.空白组PI3K、p-Akt、mTOR几乎无阳性表达。猫人参醇提取物常规剂量组、高剂量组、维甲酸组PI3K、p-Akt、mTOR阳性表达有提高,和空白组比较有差异(P<0.05)。模型组PI3K、p-Akt、mTO R阳性表达最高,和猫人参醇提取物常规剂量组、高剂量组、维甲酸组比较差异显著(P<0.05)。4.免疫组化结果显示各组胃黏膜上皮几乎都无阳性表达的LKBl。Western blot显示与空白组比较,模型组LKB1表达降低。猫人参醇提取物和维甲酸有增强LKB1水平的趋势。研究结论：猫人参醇提取物能改善PLGC大鼠的一般状况,延缓PLGC病理形态的加重,减少PLGC的发生率；可以抑制PLGC大鼠胃黏膜上皮Bcl-2、CyclinD1蛋白的表达,提高PLGC大鼠胃黏膜上皮Bax、Caspase-3蛋白的表达；可以抑制PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达,促进LKB1的阳性表达。通过作用于mTOR信号通路,调节相关蛋白的表达,影响下游细胞增殖和凋亡的基因,达到促进细胞凋亡,抑制细胞增殖的目的,可能是猫人参醇提取物治疗和延缓胃癌前病变,阻碍胃癌发生的作用机制。