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本研究探讨了铅对中枢神经系统的毒性机理,建立了体外培养新生24h内SD大鼠大脑皮质神经细胞的铅损伤模型。采用尼氏染色法、荧光染色法、MTT法及脂质过氧化相关酶试剂盒测定等方法,利用倒置相差显微镜、环境扫描电子显微镜、荧光显微镜、流式细胞仪等观察并测定了醋酸铅对神经细胞的形态、存活率、凋亡率、脂质过氧化相关酶的影响,并采用乙酰半胱氨酸(N-Acetyl Cyst- eine,NAC)对醋酸铅进行干预,评价其对神经细胞的保护效果。实验结果显示:(1)体外原代培养的神经细胞在第6d形态最佳、活力最强,可用于进一步试验研究;(2)不同浓度(50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L)醋酸铅对培养的神经细胞分别作用3h、6h、12h、24h,测定各试验组细胞形态。结果显示,染铅12h以上,细胞形态较对照组有显著差异(P﹤0.05),且随铅浓度的递增和作用时间的延长,抑制作用增强;(3)醋酸铅作用培养的神经细胞12h,各染铅组细胞存活率较对照组显著降低(P﹤0.05)[0],且随铅浓度的增加和作用时间的延长,存活率递减。(4)醋酸铅作用培养的神经细胞12h,Hoechst 33258染色5min,荧光显微镜观察结果显示,细胞核皱缩、呈新月形,染色质致密浓染,甚至核碎裂。流式细胞仪检测结果显示,随铅浓度的增高,细胞凋亡率较对照组逐渐上升;(5)醋酸铅作用培养的神经细胞12h, GSH-PX、SOD、TChE活性较对照组显著降低(P﹤0.05),而CAT和MDA则显著升高(P﹤0.05);(6)NAC保护组与染铅组比较:各保护组细胞存活率有所升高;细胞凋亡率有所下降;GSH-PX、SOD、TChE、CAT活性升高;MDA含量下降。结论:(1)醋酸铅可抑制细胞分化,影响神经细胞形态,减少细胞间连接,该作用具有剂量—时间效应。(2)铅诱导神经细胞凋亡是铅引起细胞损伤的机制之一,表现为神经细胞存活率下降,细胞凋亡数增多,该作用与染铅剂量有明显的剂量—时间效应;(3)铅的神经毒性与细胞的脂质过氧化有关,表现为神经细胞的脂质过氧化相关酶的活性变化,且该变化与染铅剂量存在剂量—时间效应;(4)NAC具有拮抗铅毒性的作用,表现为NAC对铅引起的神经细胞存活率下降、凋亡率上升具有一定的抑制作用,同时在一定程度上可缓解铅引起的氧化损伤。