蕨麻多糖对吞噬细胞功能及免疫功能低下小鼠的免疫调节作用研究

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蕨麻为鹅绒委陵菜(Potentilla anserine L.)的根,属委陵菜属,蕨麻性“甘、温”,具有生津止渴,健脾益胃,益气补血的功效,为常用藏药。药理研究表明,蕨麻提取物具有免疫调节、抗炎抗菌等活性。蕨麻多糖(Potentilla anserine L. polysaccharide ,PAP)是藏药蕨麻的主要生物活性成分之一,是蕨麻调节机体免疫功能的有效物质基础。以PAP在四种浓度(50,100,200,400mg/kg或200μg/ml)水平下,采用中性红吞噬实验检测了PAP对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;采用Griess法,观察PAP对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)产生的影响,利用流式细胞术检测了PAP对调理酵母多糖活化的中性粒细胞活性氧产生的影响;检测了PAP对中型粒细髓过氧化物酶活性的影响;以环磷酰胺(cyclophosphamide , Cy)诱导的免疫功能低下的小鼠建立免疫抑制模型,观察PAP对小鼠单核-吞噬细胞系统吞噬功能的影响,对血清溶菌酶活性的影响,对脾脏组织匀浆的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和过氧化氢酶(CAT)活力的影响,探讨了蕨麻多糖免疫调节作用,结果如下:(1)PAP可增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,并呈量效关系,其中以200和400μg/ml作用最显著(P﹤0.01);(2)PAP可提升小鼠中性粒细胞MPO的活性,并呈量效关系,其中以200和400μg/ml作用最显著(P﹤0.01); (3)PAP可以调节Cy诱导的中性粒细胞的免疫功能抑制状态,通过调节其呼吸爆发的强度,实现其免疫调节作用;(4)PAP能提升体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞产生NO,并呈量效关系,其中以200和400μg/ml作用最显著(P﹤0.01);(5)PAP能提升小鼠的碳廓清指数,并呈量效关系, 100 mg/kg的P作用最强,差异极显著(P<0.01);其中50、100、200mg/kg的PAP可拮抗由Cy造成的免疫抑制,显著提升小鼠的碳廓清指数( P﹤0.05),其中以100mg/kg作用最显著(P﹤0.01);(6)PAP在四种浓度水平,均可显著提升血清溶菌酶活力;(7)PAP能提升正常和免疫抑制小鼠血清中IL-6水平,其中在200和400mg/kg浓度水平,PAP可拮抗Cy造成免疫抑制,作用最显著(P﹤0.01);PAP在200mg/kg浓度水平可显著提升正常和免疫抑制小鼠血INF-γ的水平;(8)PAP在机体免疫系统具有抗氧化作用,其作用机制与其提高机体CAT、SOD活性有关。本试验研究结果表明,PAP可增强单核-巨噬细胞的吞噬活性、提升巨噬细胞NO和中性粒细胞MPO和Ros产生量、促进血清溶菌酶和细胞因子IL-6和INF-γ的分泌而增强机体的免疫防御能力。在机体免疫系统中,蕨麻多糖有抗氧化作用,其作用机制与其提高脾脏组织中CAT、SOD活性有关,而对GPx活性无明显改变,提示PAP可通过对吞噬细胞功能及环磷酰胺诱导的免疫功能低下小鼠的免疫调节而提升机体的免疫防御能力。
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